PCR的反应包括三个主要步骤:分别是1. Denaturation 2. Annealing of primers,3. Extension of primers。 所谓 Denaturing乃是将DNA加热变性, 将双股的DNA加热后转为单股DNA以做为的模板. 而Annealing 则是令 Primers于一定的温度下附着于模板DNA两端。 后在DNA聚合酶 e.g. Taq-polymerase 的作用下进行引物的延长 Extension of primers及另一股的合成。
实时荧光定量pcr仪,由荧光定量系统和计算机组成,用来监测循环过程的荧光。与实时设备相连的计算机收集荧光数据。数据通过开发的实时分析软件以图表的形式显示。原始数据被绘制成荧光强度相对于循环数的图表。原始数据收集后可以开始分析。实时设备的软件能使收集到的数据进行正常化处理来弥补背景荧光的差异。正常化后可以设定域值水平,这就是分析荧光数据的水平。
BioMark HD系统是将通量与敏感度集于一体的自动化***分析平台,并将***表达的研究深入到单细胞水平。与传统qPCR检测方法相比,BioMark HD系统仅需10 pg的起始实验材料,即可对群体或者单细胞进行表达谱分析,并且能在一张芯片上对多样本、多***同时进行检测。多种规格的芯片能够满足从低到高的不同通量,适用于广泛的研究需求,而且样本和***指标自由组合,用户弹性大。大量文献表明芯片内和芯片间的数据结果相关性高达0.99,具有优的重复性。