拉曼散射光谱具有以下明显的特征
a.拉曼散射谱线的波数虽然随入射光的波数而不同,但对同一样品,同一拉曼谱线的位移与入射光的波长无关,只和样品的振动转动能级有关;
b.在以波数为变量的拉曼光谱图上,斯托克斯线和反斯托克斯线对称地分布在瑞利散射线两侧, 这是由于在上述两种情况下分别相应于得到或失去了一个振动量的子的能量。
c.一般情况下,斯托克斯线比反斯托克斯线的强度大。这是由于Boltzmann分布,处于振动基态上的粒子数远大于处于振动激发态上的粒子数。
拉曼光谱在***研究中的应用
各种***因所含化学成分的不同而反映出拉曼光谱的差异,拉曼光谱在***研究中的应用包括:
(1)***化学成分分析
薄层色谱(TLC)能对***进行有效分离但无法获得各组份化合物的结构信息,而表面增强拉曼光谱(SERS)具有峰形窄、灵敏度高、选择性好的优点,可对***化学成分进行高灵敏度的检测。利用TLC的分离技术和SERS的***性鉴定结合,是一种在TLC原位分析***成分的新方法。
(2)***的无损鉴别
由于拉曼光谱分析,无需***样品,因此能对***样品进行无损鉴别,这对名贵中***的研究特别重要。
(3)***的稳定性研究
利用拉曼光谱动态跟踪***的变质过程,这对***的稳定性预测、监控***的质量具有直接的指导作用。
(4)中药的优化
对于***及和复方这一复杂的混合物体系,不需任何成分分离提取直接与***和细胞作用,利用拉曼光谱无损采集***和细胞的光谱图,观察***和细胞的损伤程度,研究其药理作用,并进行中***、和方剂的优化研究。
拉曼光谱仪使用方法
使用方法
一、开机测样
1、打开计算机和拉曼仪器,预热大约1小时;
2、打开计算机桌面上的程序操作界面,口令是“OPUS”;
3、点击测样图标,在基本设置中调入所测试样的种类并调节激光强度;在设置中更改名称和更改保存路径并设置扫描次数和时间,根据样品类型自行选择分辨率;
4、装样;(注意不可以污染镜片)
5、样品检测:选中拉曼光谱图,待出现预览谱图后,前后调节样品座位置(点击Forward?和?backward)到峰值显示大幅度;
6、回到基本设置点击样品测试开始测试样品。
二、谱图处理
1、谱图处理:点击放大图标将谱图放大,基线校正,标峰位,点击打印-新建打印模板,将左侧显示栏中的*个谱图图标拖入模板,再将第二个峰值图标拖入模板,在模板空白处新建一个表格,将峰值图标拖入表格中,剪切掉模板中多余部分包括Bruker标志(在空白处右击显示属性-范围-显示Bruker标志);
2、保存谱图:右击-,选中***后一项;打开写字板,黏贴,保存写字板;
3、保存数据:选中左侧显示栏图标,右击-显示参数-Raman,数据,黏贴到写字板。
三、关机 1、先关闭计算机,再关闭插座(即关闭激光); 2、关闭左侧仪器背面开关按钮,拔掉插头。
拉曼光谱仪常见的问题及解答
怎样避免被测试的样品被激光烧毁?
当你进行样品测试时,激光照射在样品表面的能量是非常大的,尤其在采用NIR或UV激光激发时。尤其是一些样品在光照下对热或光是十分敏感的,这会导致测量信号包含样品烧毁后的特征,而不是样品本征的信号(例如,非晶碳膜在1500cm-1波数附近的本征峰在强光激发时会显示出石墨化的碳峰)。通常遇到这样的问题时,可在样品测试前后通过显微镜白光像观察样品表面是否发生明显变化,因此需选择正确的激光功率来进行测试。
为避免样品表面烧毁,在开始测试时应选用较低的激发功率,尤其用NIR或UV激光激发时。在保证样品不被烧毁的前提下可提高激发功率以得到很强的信号。当激光功率衰减到1%仍无法避免样品烧毁时,可考虑转换低倍物镜以降低照射在样品表面的功率密度。另外还可采用欠焦照射模式或线聚焦照射模式。如果问题是由于高功率二极管激光器引起的,可考虑转换成低功率可见激发系统。
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