拉曼光谱的分析方向
拉曼光谱仪分析技术是以拉曼效应为基础建立起来的分子结构表征技术,其信号来源与分子的振动和转动。
拉曼光谱的分析方向有:
定性分析:不同的物质具有不同的特征光谱,因此可以通过光谱进行定性分析。
结构分析:对光谱谱带的分析,又是进行物质结构分析的基础。
定量分析:根据物质对光谱的吸光度的特点,可以对物质的量有很好的分析能力。
拉曼光谱在***研究中的应用
各种***因所含化学成分的不同而反映出拉曼光谱的差异,拉曼光谱在***研究中的应用包括:
(1)***化学成分分析
薄层色谱(TLC)能对***进行有效分离但无法获得各组份化合物的结构信息,而表面增强拉曼光谱(SERS)具有峰形窄、灵敏度高、选择性好的优点,可对***化学成分进行高灵敏度的检测。利用TLC的分离技术和SERS的***性鉴定结合,是一种在TLC原位分析***成分的新方法。
(2)***的无损鉴别
由于拉曼光谱分析,无需***样品,因此能对***样品进行无损鉴别,这对名贵中***的研究特别重要。
(3)***的稳定性研究
利用拉曼光谱动态跟踪***的变质过程,这对***的稳定性预测、监控***的质量具有直接的指导作用。
(4)中药的优化
对于***及和复方这一复杂的混合物体系,不需任何成分分离提取直接与***和细胞作用,利用拉曼光谱无损采集***和细胞的光谱图,观察***和细胞的损伤程度,研究其药理作用,并进行中***、和方剂的优化研究。
拉曼光谱仪常见的问题及解答
为什么待测样品的信号很弱?信噪比很差?
当进行样品测试时发现拉曼光谱信号很弱,首先要检查样品是否正确放置在显微镜下并且处于聚焦状态。你也可以将测试区域移到样品的另一个部位。同时检查仪器是否处于常规状态而不是处在共焦状态。如果激光功率小于100%,应尝试提高功率增强信号。如果光谱噪声很大,可采用增加扫描积分时间或积分次数来提高信噪比。
增加扫描积分时间可以让CCD获取更多的拉曼信号,增强整个无关噪声的特征。该法适宜于当背景和拉曼信号都低的情景。当两者都不强时,增加积分时间只会增加CCD探测器饱和的机会。
对几个特定的扫描光谱进行数据叠加可以增强随机背景噪声下的拉曼信号,增加信噪比。
适当选择扫描积分时间和积分次数可获得很大可能的***度增加信噪比。不过要注意一点:信噪比跟积分次数的平方根成正比,叠加四次可获得二倍信噪比的提高。
另一个与信噪比密切相关的参数是信背比。如果背景部分很高,将会湮盖拉曼信号只给出系统噪声。
拉曼光谱仪中的拉曼效应是指什么
拉曼光谱即拉曼散射光谱,这种散射不包括能级间的直接跃迁。处于振动基态的分子,吸收了进射光子的能量,跃迁到一个假设的激发态,这激发态事实上并不存在于散射物质的分子中。 拉曼光谱是一种阶数更高的光子——分子相互作用,要比红外吸收光谱的强度弱很多。但是由于它产生的机理是电四极矩或者磁偶极矩跃迁,并不需要分子本身带有极性,因此特别适合那些没有极性的对称分子的检测。拉曼光谱技术的优越性:提供快速、简单、可重复、且更重要的是无损伤的定性定量分析,它无需样品准备,样品可直接通过光纤探头或者通过玻璃、石英、和光纤测量。目前拉曼光谱分析技术已广泛应用于物质的鉴定,分子结构的研究谱线特征。 拉曼效应是指照射到物质上发生弹性散射和非弹性散射.弹性散射的散射光是与激发光波长相同的成分.非弹性散射的散射光有比激发光波长长的和短的成分。 拉曼散射光谱具有以下明显的特征: a.拉曼散射谱线的波数虽然随入射光的波数而不同,但对同一样品,同一拉曼谱线的位移与入射光的波长无关,只和样品的振动转动能级有关; b.在以波数为变量的拉曼光谱图上,斯托克斯线和反斯托克斯线对称地分布在瑞利散射线两侧,这是由于在上述两种情况下分别相应于得到或失去了一个振动的能量。 c.一般情况下,斯托克斯线比反斯托克斯线的强度大。这是由于Boltzmann分布,处于振动基态上的粒子数远大于处于振动激发态上的粒子数。
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