首先超低温冰箱不一定可以做到程序控温,就算我们倍玛特生产的一些定制型超低温冰箱,可以有程序降温功能,但是在降温的时候程序的均匀度就完全没有程序冷冻仪那么了,因为低温冰箱主要是压缩机制冷,所以制冷量有限,而倍玛特品牌的程序冷冻仪是用液氮降温,只要液氮足够,制冷量也完全是足够的,关键就是倍玛特的控制软件运行后,怎么做到降温的均匀,这样才是真正的程序控温。
细胞冷冻保存,1. 材料:生长良好之培养细胞、新鲜培养基、DMSO (Sigma D-2650)、无菌塑料冷冻保存管(Nalgene 5000-0020)、0. 4%(w/v)trypan blue(GibcoBRL15250-061)、血球计数盘与盖玻片、细胞冻存程序仪(也称为程序降温仪。冷冻保存方法:(1)传统方法: 冷存管置于4 ℃10分钟--->-20 ℃30分钟--->-80 ℃ 16~18小时(或隔夜)--->液氮槽vaporphase长期储存。-20 ℃不可超过1小时,以防止胞内冰晶过大,造成细胞大量,亦可跳过此步骤直接放入-80 ℃冰箱中,惟存活率稍微降低一些。(2)程序降温:利用已设定程序的等速细胞冻存程序仪以-1~-3 ℃/分钟之速度由室温降至(-80 ℃以下)-120 ℃,再放在液氮槽vaporphase长期储存。适用于悬浮型细胞与hybridoma之保存。
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