细胞冷冻保存,1.  材料：生长良好之培养细胞、新鲜培养基、DMSO (Sigma D-2650)、无菌塑料冷冻保存管(Nalgene　5000-0020)、0.  4%(w/v)trypan blue(GibcoBRL15250-061)、血球计数盘与盖玻片、细胞冻存程序仪(也称为程序降温仪。冷冻保存方法：(1)传统方法: 冷存管置于4 ℃10分钟--->-20 ℃30分钟--->-80 ℃ 16～18小时(或隔夜)--->液氮槽vaporphase长期储存。-20 ℃不可超过1小时，以防止胞内冰晶过大，造成细胞大量，亦可跳过此步骤直接放入-80 ℃冰箱中，惟存活率稍微降低一些。(2)程序降温：利用已设定程序的等速细胞冻存程序仪以-1～-3 ℃/分钟之速度由室温降至(-80 ℃以下)-120 ℃，再放在液氮槽vaporphase长期储存。适用于悬浮型细胞与hybridoma之保存。

程序降温仪其主要功能是：可以根据各种被冻存样品不同的需求，选择一种适合的降温速度进行冷冻。从而使被冻样品的复苏成活率得到很大的提升。由于智能程序降温仪的使用很灵活简便,该仪器特别适用于：探索和优化各种被冻样品的冻存方案。上位机软件按照用户的编程，计算出当前的目标温度与实测温度的偏差值，用比例、微分、积分算法算出控制量。通过PDI输出电路去控制电磁阀的开关。当电磁阀开通时，液氮喷入冷冻室，风扇使液氮雾化并均匀地在箱内循环。改变电磁阀的开关频率，就控制了箱内的降温速度

程序降温仪能够提供可靠和的样品温度调节。控制器使用一个侍服系统,通过持续可变的热流调节使得样品得温度达到预设的或通过电脑程序设定的温度。温度程序执行,温度可以设定达到控制范围内的任一点。

控制范围适用于大多数的应用。如果需要在特定范围以下的温度,可以通过“freefall”来实现,控制器会显示实际温度。控制器也能提供设定速率的样品解冻功能。温度控制精度为<±0.1°C。 的电路设计和出色的温度控制的长期稳定,并且保证低维护和***成本。

所有的控制器有可选择的电源,精致的电源装置。控制器的温度程序可预设或编程。预设程序的控制器含有一内置的程序芯片包含了需要运行冷冻系统的信息;可编程的控制能购用我们的软件(CryoGenesis)通过电脑来编程。