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作者:倍玛特2022/4/29 2:33:47






注意事项:1、选择合适的冻存架和样品温度探头;2、冻存管样品探头插入深度至少为样品内二分之一,探头顶端不得接触管壁;3、血袋样品温度探头请压在血袋下方,且确保片状光滑面(无探头线突出来的一面)紧贴血袋;4、样品与模拟样品(放探头样品)放入冻存腔体时,必须是同一温度;5、必须在样品温度与腔体温度都静置到相同的步温度时,才能再次按RUN开始第二步的降温;



快速降温保存,即玻璃化方法就是用高浓度的冷冻稀释液,以极快的速率降温,使溶液内没有足够的时间形成冰晶核就直接转变成无形态的玻璃样固体的过程。此方法的优点是不用的程序控制降温仪,操作简便、快速,减轻损伤,但是由于在降温过程中需要加入大量的冷冻保护剂,高达40-60%v/v,这些冷冻保护剂往往存在一定毒性会内部细胞,同时由于玻璃化过程中为了确保整个生物样品的内部和外部均能实现快速降温,需要减少样品的尺寸、以及增加和外界超低温环境(比如液氮)的接触面积。因此这种暂时只适用于小尺寸、小计量生物样品的保存,仅有ul单位。所以,目前大家还是通常采取慢速降温进行低温保存。



在细胞冻存的过程中,样本内水分会从液相转变为固相,水分也随之散失,导致细胞内盐、代谢物浓度改变,进而造成渗透压失衡,直接影响冻存细胞的复苏。同时冷冻的速率太快或者太慢,容易导致细胞内水分丧失或形成大冰晶,都不利于细胞存活。另外,生物样本内水分的相变过程也伴随着潜热释放的现象,在从液相转变为固相时会释放出大量热量,使样本温度瞬速上升。



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