不同培养基的体积对抑菌圈的抑菌圈测定仪

（1）接种液准备：按照标准规定，用PBS缓冲液稀释***悬液至1×106cfu/mL～5×106cfu/mL。

（2）培养基准备：分别用移液制备10 mL、15mL、20 mL、25 mL四个不同体积的培养基各6个（3个用于ATCC6538金***，另3个用于8099大肠）。

（3）试样接种：用无菌棉拭子蘸取接种菌液，在平皿的培养基表面均匀涂抹3次，每涂抹1次，平皿转动60°，后将棉拭子绕平皿边缘涂抹一周，盖上盖子，置室温干燥5 min。

（4）贴试样：将试样平贴在培养基上，用无菌镊子轻压试样，使其紧贴培养基表面。每个培养基贴一块试样于中间位置。

（5）培养：倒置平皿，放入生化培养箱中37℃培养16h～18 h。

（6）测量：测出每个平皿中的抑菌圈外沿总宽度及试样总宽度，进而算出抑菌圈宽度，求出平均值。

从试验结果可看出，不同体积的培养基对抑菌圈的影响还是比较大的。培养基体积为10 mL和15 mL时，抑菌圈相差不大，但当培养基增加到20 mL时，抑菌圈骤降，下降率超过20%。总体来说，随着培养基体积的增加，厚度也，但抑菌圈却反而变小。原因可能是体积增大，越多的剂渗透到了培养基底层，从而影响了表面的抑菌圈大小。

抑菌圈测定仪方法

管碟法：在含菌培养基平面上放置一定大小的不锈钢圈，在其中滴加药液，通过药剂水平扩散形成大小不同的抑菌圈来比较药剂毒力。目前上将此法定为的标准方法。此外还用于素类药剂的筛选、定性定量分析和在动植物体内残留量的测定方面。

滴下法：利用、毛细管等器具，将药液直接滴加在含菌培养基平面上，培养一定时间后，根据抑菌圈大小不同来比较药剂毒力的方法

抑菌圈测定仪简介

抑菌圈分析仪又叫抑菌圈测定仪通过图像分析软件及多种计算方法对微生物产生的抑菌圈进行生物效价、敏感度、血药浓度、生物利用度的测定，从而实现快速准确的实验分析。抑菌圈分析仪广泛应用于生产、检测与研究的药厂、药检所、***以及相关的院校与研究所。又可称为抑菌圈分析仪，数字式抑菌圈测量仪，效价测量仪，抑菌圈测量分析仪，抑菌圈测定仪，抑菌圈测量仪，抑菌圈自动测量分析仪。

抑菌圈测定仪注意事项

1.所有的操作用具和材料都要事先做灭菌处理，操作必须在无菌室（或无菌箱）内于火焰旁进行。

2.霉菌、***、酵母菌等各种微生物都必须分别配置混合菌液，即这里指的混合菌液是霉菌或酵母菌等诸种菌的分别混合液，并非霉菌、***和酵母菌的混合液。

3.混合菌液的浓度一般为106~108cfu/mL.

4.倒入培养皿的琼脂培养基温度不能太高（一般为45℃左右），否则会引起微生物。也不能太低，因为琼脂会很快凝结，以致搅拌不均匀，影响试验结果。

5.各种微生物的适生长温度不同（例如霉菌一般为25~30℃，***一般为32~37℃等），恒温培养时宜分开放置。