不同培养基的体积对抑菌圈的抑菌圈测定仪

（1）接种液准备：按照标准规定，用PBS缓冲液稀释***悬液至1×106cfu/mL～5×106cfu/mL。

（2）培养基准备：分别用移液制备10 mL、15mL、20 mL、25 mL四个不同体积的培养基各6个（3个用于ATCC6538金***，另3个用于8099大肠）。

（3）试样接种：用无菌棉拭子蘸取接种菌液，在平皿的培养基表面均匀涂抹3次，每涂抹1次，平皿转动60°，后将棉拭子绕平皿边缘涂抹一周，盖上盖子，置室温干燥5 min。

（4）贴试样：将试样平贴在培养基上，用无菌镊子轻压试样，使其紧贴培养基表面。每个培养基贴一块试样于中间位置。

（5）培养：倒置平皿，放入生化培养箱中37℃培养16h～18 h。

（6）测量：测出每个平皿中的抑菌圈外沿总宽度及试样总宽度，进而算出抑菌圈宽度，求出平均值。

从试验结果可看出，不同体积的培养基对抑菌圈的影响还是比较大的。培养基体积为10 mL和15 mL时，抑菌圈相差不大，但当培养基增加到20 mL时，抑菌圈骤降，下降率超过20%。总体来说，随着培养基体积的增加，厚度也，但抑菌圈却反而变小。原因可能是体积增大，越多的剂渗透到了培养基底层，从而影响了表面的抑菌圈大小。

抑菌圈测定仪方法

管碟法：在含菌培养基平面上放置一定大小的不锈钢圈，在其中滴加药液，通过药剂水平扩散形成大小不同的抑菌圈来比较药剂毒力。目前上将此法定为的标准方法。此外还用于素类药剂的筛选、定性定量分析和在动植物体内残留量的测定方面。

滴下法：利用、毛细管等器具，将药液直接滴加在含菌培养基平面上，培养一定时间后，根据抑菌圈大小不同来比较药剂毒力的方法

抑菌圈测量仪操作规程

1 开主机电源,打开分析仪电源(电源灯,手动/自动灯应亮)

2 仪器自检完毕,在C:>状态输入ZW96回车,按'ESC'出现框图,回车.

3 先用'→'移至'报告'项下,回车,用'↓'移至'实验登记'项下,回车,输入所需信息.

4 用'→'移至'自动'项下,放入碟子,回车,输入所需的信息(注:碟子的放置,SL必须放在高位,且顺序为顺时针方向依次为:SL→TL→SH→TH),回车,按主机的提示进行操作,操作完毕,回车,出现测量结果,按主机的提示进行操作(注意:打印结果时,一定要选用不带表格打印).如果测量时抑菌圈不清淅,调节'对比度'和'亮度'按'ESC',如合适,按回车,否则,重复上述操作.

5 操作完毕,取出碟子,关机:先用'←'移至'文件'用'↓'移至'退出ALT',回车,关主机电源→关分析仪电源→关电源插座.

6．在使用记录本上登记使用的情况.