抑菌圈测定仪操作步骤

1.抑菌圈法常用于产生菌的分离筛选。工具菌采用的敏感菌。若被检菌能分泌某些***工具菌生长的物质，如等，便会在该菌落周围形成工具菌不能生长的抑菌圈，很容易被鉴别出来。　　

2.用接种环挑取各试管斜面的于带玻璃珠的无菌水中，用手振荡数分钟使孢子分散，过滤后制成混合孢子悬液。

3.向各培养皿内注入15Ml-20ml的熔化状琼脂培养基，将菌液与培养基混合均匀，待其冷却。　　

4.用无菌吸管向各培养皿中注入一定浓度的混合孢子悬浮液0.5mL。　　

5.用镊子将圆片滤纸在不同浓度的防霉剂中浸渍片刻，取出置于带菌培养基平板的***，盖上盖子。　　

6.置适宜温度下，培养2-3天，观察滤纸片圆片周围抑菌圈的有无及大小。　　

7.霉菌、***、酵母菌等各种微生物都必须分别配置混合菌液，即这里指的混合菌液是霉菌或酵母菌等诸种菌的分别混合液，并非霉菌、***和酵母菌的混合液。　　

8.所有的操作用具和材料都要事先做灭菌处理，操作必须在无菌室（或无菌箱）内于火焰旁进行。　　

9.倒入培养皿的琼脂培养基温度不能太高（一般为45℃左右），否则会引起微生物。也不能太低，因为琼脂会很快凝结，以致搅拌不均匀，影响试验结果。　　

10.各种微生物的较适生长温度不同（例如霉菌一般为25-30℃，***一般为32-37℃等），恒温培养时宜分开放置。

抑菌圈测定仪使用方法

孔碟法：在含菌培养基上直接打孔，药液滴于小孔内，通过药剂的扩散而形成大小不同的抑菌圈来比较药剂的毒力。一般是用打孔器在凝固后的培养基平面上打孔，也可将不锈钢杯放于培养皿内，然后在培养皿内倒入含菌培养基液，凝固后取出不锈钢杯，使培养基平面留下小孔。

洋菜柱法：将含有药剂的洋菜柱放于含菌的培养基平面上，因药剂的水平扩散而形成抑菌圈，根据抑菌圈大小不同来比较药剂的毒力。洋菜柱的制作为，将一定浓度的药液与一定量熔化后的培养基混合，放于培养皿内，凝固后用打孔器打取一定大小的洋菜柱即可。

抑菌圈测定仪的由来

抑菌圈(Zone of inhibition)是福莱明发现青的过程中，提出的一个词汇。他发现,接种了青霉的培养皿中，青霉的周围不生长***,而在远离青霉的地方有***生长。不生长***的地方，是一个以青霉菌落为圆心的一个规则的圆，这个圆圈被福莱明称为抑菌圈。

后来，福莱明发现，这个抑菌圈的出现与青霉分泌的青有关，青有杀菌的作用，将青霉周围一定范围内的***全部，所以形成了一个以青霉为圆心的没有***生长的抑菌圈。抑菌圈直径大小以 mm 作为计量单位。