抑菌圈测定仪测量与计算法:
(1)测量效价:高低剂量法,包括***药典规定的二剂量﹑三剂量法及一剂量法;
(2)测量敏***,采用带校正的排序法;
(3)测量一个双碟的时间≤0.04秒;
(4)测量单个抑菌圈的直径,仪器的重现性的相对标准误差<0.1%;
(5)旋转定标圈,仪器对其四个方向上的均匀度的相对标准误差<0.1%;
(6)对同一组检品的效价值,仪器的重复测量误差<0.5%;
不同培养基的体积对抑菌圈的抑菌圈测定仪
(1)接种液准备:按照标准规定,用PBS缓冲液稀释***悬液至1×106cfu/mL~5×106cfu/mL。
(2)培养基准备:分别用移液制备10 mL、15mL、20 mL、25 mL四个不同体积的培养基各6个(3个用于ATCC6538金***,另3个用于8099大肠)。
(3)试样接种:用无菌棉拭子蘸取接种菌液,在平皿的培养基表面均匀涂抹3次,每涂抹1次,平皿转动60°,后将棉拭子绕平皿边缘涂抹一周,盖上盖子,置室温干燥5 min。
(4)贴试样:将试样平贴在培养基上,用无菌镊子轻压试样,使其紧贴培养基表面。每个培养基贴一块试样于中间位置。
(5)培养:倒置平皿,放入生化培养箱中37℃培养16h~18 h。
(6)测量:测出每个平皿中的抑菌圈外沿总宽度及试样总宽度,进而算出抑菌圈宽度,求出平均值。
从试验结果可看出,不同体积的培养基对抑菌圈的影响还是比较大的。培养基体积为10 mL和15 mL时,抑菌圈相差不大,但当培养基增加到20 mL时,抑菌圈骤降,下降率超过20%。总体来说,随着培养基体积的增加,厚度也,但抑菌圈却反而变小。原因可能是体积增大,越多的剂渗透到了培养基底层,从而影响了表面的抑菌圈大小。
抑菌圈测定仪的由来
抑菌圈(Zone of inhibition)是福莱明发现青的过程中,提出的一个词汇。他发现,接种了青霉的培养皿中,青霉的周围不生长***,而在远离青霉的地方有***生长。不生长***的地方,是一个以青霉菌落为圆心的一个规则的圆,这个圆圈被福莱明称为抑菌圈。
后来,福莱明发现,这个抑菌圈的出现与青霉分泌的青有关,青有杀菌的作用,将青霉周围一定范围内的***全部,所以形成了一个以青霉为圆心的没有***生长的抑菌圈。抑菌圈直径大小以 mm 作为计量单位。
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