沉淀型TMB单组份(HRP底物)
即用型,用于标记物为HRP的WB实验。TMB在辣根过氧化物酶的催化下与氧化剂反应生成水溶性的蓝色产物,此产物可被沉淀出来用于免0疫印记(WB)实验。本品具有非常高的灵敏度,特别适用于需要较高信噪比的实验。TMB是一种非致***性底物,不易褪色,优于DAB、AEC和4-CN。
Catalog_no BF06009
Product_name 沉淀型TMB单组份(HRP底物)
Category WB、IHC、ELISA相关***
加生物素化抗0体
1. 去掉缓冲液,擦掉切片周围的液体。
2. 加生物素化抗0体,完全覆盖切片。
3. 室温孵育 30min。
4. 用洗涤液洗去抗0体,用洗涤液润洗 5min。
加亲合素-HRP
2. 加亲合素-HRP,完全覆盖切片。
4. 用洗涤缓冲液洗去亲合素-HRP,用洗涤缓冲液润洗 5min。
显色
1. 加显色液(自备)显色。
可能出现的问题和解决方法
注意事项
1. 用辣根过氧化物酶时不要使用含有叠氮钠的***。
2. 避免使用含次氯酸的去污剂。
3. 设阳性对照、阴性对照和***对照。
4. 不要使用卵清蛋白作为切片粘连剂,使用明胶或多聚赖氨酸。
5. 孵育过程中不要使片子干掉。
6. 洗涤后洗涤液尽量去净。
7. 用低熔点石蜡以减少抗原变性(> 60°C)。
8. 用新鲜配制的 4%缓冲多聚甲醛可更好保存抗原活性。
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