细胞冻存步骤

1. 常规方法收集对数期的贴壁细胞或悬浮细胞于试管中。

2. 根据培养细胞的密度和冻存管的大小确定所需冻存细胞数。

3. 将所需数目的细胞悬浮液置于离心管中，1000rmp，5分钟离心收集培养细胞沉淀，彻0底弃去离心管中的上清液。

4. 加入适量的CELLS***ING?细胞冻存液于离心管中，使细胞浓度约为5×105-1×107/ml。轻柔地混匀细胞，制成细胞混合液。

5. 将离心管中的细胞混合液分装于已标记的冻存管中，建议每管1ml或1.5ml。

6. 直接将分装好的细胞冻存管放入-80℃超低温冰箱中，可长期冷冻保存。

7. 如果想液氮中长期保存，需先放入-80℃冰箱至少一天时间，方可移至液氮罐中保存。

存储条件

储存于4℃以下,质量保障期从产品的生产日期起，为期两年。3个月以上没有使用冻存液计划时，尽可能-20℃冷冻保存。为避免重复冻融过程可能导致的冻存液品质下降和性能降低，推荐将产品分装成小管后，再存放于4℃以下或-20℃冰箱冻存。

冻存细胞复苏步骤：

1、 从冰箱中取出冻存的细胞，立即置于37℃水浴槽中快速解冻。

2、 待冻存管中的细胞混合液完全融化后，立即加入1ml细胞培养基于冻存管中与细胞混合，将其中的混合液移至含有约5ml该细胞培养基的离心管中，1000rmp离心5分钟，收集冻存细胞沉淀，移去上清液（注意勿将细胞沉淀倒掉）。

3、 加入适量的新鲜培养基，使用移液管缓缓加入细胞沉淀中，轻柔混匀，将混匀好的细胞移至事先准备好的培养容器中。

4、 镜检观察，待细胞状态***后可进行其他研究或者培养处理。

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