小鼠抗人IgG3值得信赖 博特龙技术有限公司
作者:博特龙2022/3/2 5:27:54







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博奥龙公司主要产品有抗0体制备全套产品、病毒包装相关产品、2万多种科研用抗原抗0体、1200多种二抗,涵盖20多个物种和HRP、Biotin、FITC、AU、PE、Dylight、Alexa Fluor、Cy3、Cy5、 AMCA、TRITC、Texa Red等标记二抗;品类齐全的内参标签抗0体;另有WB、IHC、ELISA、细胞培养相关试剂及诸多特色产品和特色技术服务。


1.选择部分样品进行预实验,参考目的蛋白一抗说明书进行3个稀释度的预实验

2.向客户反馈预实验结果,等待客户确认预实验结果后确定是否进行正式实验

3.请您提供质量0保证的一抗(或委托我公司代购)。抗0体的使用量通过预实验后进行确认,一般不回收使用一抗

4.如果需要对膜上目的蛋白进行抗0体剥离(洗脱或者 stripping)的,请提前说明



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多抗制备的概念:由多个B淋巴细胞克0隆所产生的,受到多种抗原决定簇刺激并可与多种抗原表位结合的抗0体。多抗制备主要包括以下几个步骤:免0疫动物、佐剂、免0疫原、免0疫、取血等。


多抗制备的制备步骤

一、器材

剪刀(剪兔毛用)一把、弯头眼0科手术镊子(游离血管用)一把、直头眼0科手术剪(剪血管用)一把,手术刀架,手术刀片,注0射器(1ml、10ml,25ml)附针头,兔子固定架,灭菌三角烧瓶(200ml)或平皿(直径18cm)、弯头止血钳四把,直头止血钳两把,手术缝合线,塑料放血管,纱布等。

二、试剂

生理盐水

弗氏完全佐剂

弗氏不完全佐剂

二甲0苯,酒精棉,脱脂棉,2% NaN3

三、免0疫原:蛋白或KLH偶联的多肽。每次免0疫100-200μg免0疫原。

四、兔子的选择

兔子的重量应在四斤以上,两耳光滑,明显可见耳静、动脉,健康。

五、免0疫

用生理盐水稀释免0疫原,然后与相应的佐剂进行1:1混合。抗原和佐剂完全混合形成稳定的乳剂,将该乳剂在兔子双肩周围的皮肤下进行皮下0注射和后大腿进行肌肉注射。每个区域大约用1/4的免0疫原。这样免0疫原可以持久存在从而提高免0疫应答。







在血液、和组织液里的抗0体主要是IgM和IgG。在正常血浆中,IgM约占血浆内总抗0体量的10%。IgM的杀菌、溶菌、促进吞噬作用及凝集抗原的作用都比IgG强,它也能中和细菌外和阻止病毒。人若缺乏IgM,可能引起致死性的。IgG占血浆内抗0体总量的70%~0%,由于它的分子量较小,通透性大,所以在体内分布。它能进入组织液和脑脊液内;并能通过进入胎儿体内。IgA具有明显的和抗病毒作用,分泌型的IgA存在外分泌物中,如初乳、泪液、唾液、胆汁以及消化道、呼吸道和尿、生殖道的粘膜分泌液中。而且,血液中的,IgA也能在里形成大量分泌型IgA,由胆汁排人十二指肠,构成外界物质通向体内的道防线,阻止上述管腔内的抗原物质在管壁附着。因此,IgA是抗粘膜的一个重要抗0体,使整个内脏的功能都能得到增强。





人们抽取动物的血液,分离出含抗0体的。这种体内生产抗0体的传统方法有许多缺点。例如所获得的抗0体不纯,不能连续生产,动物饲养与管理工作繁重等,故长期以来医学家们一直在探索在试管内(即体外)生产抗0体的方法, 1976年英国剑桥大学两位科学家Milstein和Koh1er将小鼠瘤细胞与小鼠的脾细胞杂交。小鼠瘤细胞能在体外增殖传代并能分泌无抗0体活性的球蛋白;小鼠脾细胞能产生针对某种抗原的抗0体,但不能在体外增殖。将两者融合成一种杂交瘤细胞,后者继承了两个亲代细胞的特点,既可在体外增殖,又可产生针对某种抗原的抗休。一个杂交瘤细胞在体外不断增殖所形成的细胞集团,被称之为。


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