-20℃保存
本产品是含有次黄piào呤(H)、氨基蝶呤(A)、胸苷(T)和甘氨酸的混合物,适用于杂交瘤筛选和细胞培养应用。
HAT选择性培养基,HAT是黄piào呤(Hypoxantin)、氨基蝶呤(Aminopterin)和胸腺嘧0啶脱氧核苷(Thymidin)三种物质英文首字母缩写,用于筛选具有次黄piào呤磷酸核糖转移酶(HPRT)或胸苷激酶(TK)活性缺陷细胞的培养基,是含有次黄piào呤(H)、氨基蝶呤(A)、胸苷(T)和甘氨酸的完全培养基。在氨基蝶呤(二氢叶酸类似物)存在下,这种酶缺陷的细胞不能通过核苷酸合成旁路合成次黄piào呤和胸苷。HPRT和TK缺陷细胞可以在此培养基中生存。是常用的骨0髓杂交瘤细胞选择性培养基
本品提供了FITC快速标记所需全部***,用于含有伯氨基(NH2-)的蛋白/抗0体/多肽或者其他大分子的标记。待标记物上的赖氨酸残基的游离ε-氨基可与FITC 发生亲核反应,形成硫0脲连接而共价结合,形成稳定性的偶联物。
产品特点
1. 使用方法简单,无需额外准备***
2. 通过离心脱盐和去除游离的FITC,无需透析或者凝胶过滤
3. 本***盒配备指示剂,确保游离FITC去除完全
1.***盒组分
1.1. 包被缓冲液(10×浓缩) 25ml ×1 瓶
1.2. BSA 封闭液(10×浓缩)100ml ×1 瓶
1.3. 洗涤缓冲液(20×浓缩)250ml ×1 瓶
1.4. 可溶性 TMB 单组分 250ml×1 瓶
1.5. 终止液 120ml×1 瓶
1.6. HRP 标记抗小鼠 IgG (H+L)抗0体:1 ml ×1 支(0.1mg/ml)
储存在 2~8℃,有效期 2 年,可以完成 20 块 96 孔酶标板检测。
2.***盒不提供的***或耗材
2.1. 小鼠的一抗
2.2. 亲和层析纯化的未标记捕获抗0体
2.3. 酶标板(不建议用***培养板)
2.4. 吸水纸、毛巾或棉布
2.5. 蒸馏水或纯化水
2.5. 移液器***瓶等
2.6. 多通道排***和加液槽
2.7. 手套
2.8. ***头
3.检测原理
3.1 杂交瘤筛选
可以检测杂交瘤培养液中的特异性抗0体,使用适当标记二抗,可以检测抗原特异性的小
鼠抗0体。
4.3.2 洗板
加标本和酶标抗0体后需要洗涤,通过洗涤可以去掉未反应***帮助降低本底。满意的洗涤方法是孔与孔之见均匀一致并且没有液体的相互污染。洗涤时将板子翻转并将液体甩掉拍净。洗涤液中含有 0.1%吐温-20 以***非特异性结合。如果实验过程中断,应该将酶标板中加入洗涤液以避免酶标板干燥。
4.3.3 HRP 标记抗0体
HRP 标记的抗0体作为检测抗0体,与底物反应后,使底物显色。实验过程中避免接触叠
氮钠,叠氮钠可使 HRP 失活。
4.3.4 底物
使用 TMB 底物,一般来说,产生的颜色与待测物浓度呈正比。
版权所有©2024 产品网