杂交瘤筛选杂交瘤细胞的获得是单克0隆抗0体制备的基础，但是如何从复杂的细胞群体中获得高质量抗0体还需要通过高通量的筛选技术。

常规筛选平台中，我们采用的是手工排***和96孔板进行筛选。依赖实验人员的手工操作、筛选通量低，并且数据不可追0踪。同时也需要实验人员非常合理有效的安排实验、避免人为失误，尤其是在阳性样品Hit Picking时，从成千上万个样品中挑选阳性样品，且不能出错，这对实验人员是个非常大的挑战。

用细胞融合术建立杂交瘤细胞时，饲养细胞的加入是不可缺少的，常用的有正常小鼠腹腔巨噬细胞、脾细胞、胸腺细胞，也有人用经过照射或丝0裂霉0素处理的纤维母细胞，如3T3或Putler等。克0隆化培养方法常用如...单克0隆抗0体制备过程中的专一抗0体检测阳性的检测原理是什么

单克0隆抗0体制备过程中的专一抗0体检测阳性的检测原理是什么。首先依抗0体的分泌情况筛选出高抗0体分泌孔，将孔中细胞再行克0隆化，尔后进行...杂交瘤单克0隆抗0体制备常见问题解答

5.2 1X BSA 封闭液:

杂交瘤筛选：稀释浓缩 BSA 稀释/封闭液（1ml 浓缩 BSA 稀释/封闭液+9ml 蒸馏水）

其它检测：稀释浓缩 BSA 稀释/封闭液（1ml 浓缩 BSA 稀释/封闭液+9ml 蒸馏水）

注意：如果在 10X 中出现结晶，加热到室温或 37℃混匀并再溶解。

5.3 1X 洗涤液：

浓缩洗涤液 20 倍稀释（1ml 浓缩洗涤液+19ml 蒸馏水）。稀释的洗涤液室温稳定至少

6 个月。

5.4 二抗工作液：

二抗浓缩液浓度为 0.1mg/ml，2～8℃稳定至少 1 年，使用前用 1X BSA 稀释/封闭液稀释，对大多数实验而言，0.1～2.0μg/ml 工作浓度。

5.5 可溶性 TMB 单组分：直接使用。

5.6 终止液：直接使用。

5.7 标本

5.8 对照

6.实验优化

通过 3 个变量来优化 ELISA 条件: ***浓度、温度、孵育时间。一般情况下，室温反应对大多数实验能够得到很好的结果。 优化不同***浓度和不同孵育时间，选择***佳的实验条件。在优化***佳浓度时，第yi一个 ***倍比稀释，然后第二个***倍比稀释，每一孔都对应于第yi个***和第二个***的某一个稀释度的组合。