沉淀型TMB单组份(HRP底物)
即用型,用于标记物为HRP的WB实验。TMB在辣根过氧化物酶的催化下与氧化剂反应生成水溶性的蓝色产物,此产物可被沉淀出来用于免0疫印记(WB)实验。本品具有非常高的灵敏度,特别适用于需要较高信噪比的实验。TMB是一种非致***性底物,不易褪色,优于DAB、AEC和4-CN。
Catalog_no BF06009
Product_name 沉淀型TMB单组份(HRP底物)
Category WB、IHC、ELISA相关***
异硫qing酸荧光素(FITC)是免0疫分析中***常用的荧光物质,FITC-酪胺信号放大系统可显著增强基于辣根过氧化物酶标记的ELISA和免0疫组化的检测灵敏度。
FITC-酪胺在辣根过氧化物酶催化下氧化,产物迅速共价结合在固定相蛋白质上,再检测FITC(荧光检测或用标记的抗FITC抗0体检测)。
通过此技术,可显著提高检测的灵敏度和降低***的使用量。
信号放大首0选生物素-酪胺信号放大***盒(链接),但如果样品存在含生物素等情况,可以选择本***盒。
1. 检测细胞或***中是否含有内源性过氧化物酶的方法:将***切片水化后,加入底物DAB,如果变为棕色,说明***切片含有过氧化物酶,需要封闭内源性过氧化物酶活性。
2.检测细胞或***中是否含有内源性碱性磷酸酶的方法:将***切片水化后,加入底物BCIP/NBT,如果变为棕色,说明***切片含有内源性碱性酶,需要封闭其活性。
3.影响过氧化物酶的分子有血红素蛋白如红细胞中的血红蛋白,肌肉细胞中的肌红蛋白,粒细胞和单核细胞中的细胞色素及肝0脏和shen脏之中的触媒。
加生物素化抗0体
1. 去掉缓冲液,擦掉切片周围的液体。
2. 加生物素化抗0体,完全覆盖切片。
3. 室温孵育 30min。
4. 用洗涤液洗去抗0体,用洗涤液润洗 5min。
加亲合素-HRP
2. 加亲合素-HRP,完全覆盖切片。
4. 用洗涤缓冲液洗去亲合素-HRP,用洗涤缓冲液润洗 5min。
显色
1. 加显色液(自备)显色。
可能出现的问题和解决方法
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