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作者:博特龙2022/2/4 14:31:36






Hybridoma Feeder 添加因子是一种适应性培养基,可用于大鼠和小鼠单克0隆抗0体制备过程中,例如,融合、亚克0隆以及新复苏细胞的培养等,具有明显的促进杂交瘤细胞生长的能力,可替代常规的饲养细胞。

相比饲养细胞,Hybridoma Feeder 添加因子具有如下特点:

1.  可以提高杂交瘤细胞的生长速度。

2.  用于新融合细胞,可使克0隆集落增多、增大。

3.  杂交瘤亚克0隆时,可以提高亚克0隆效率。

4.  完全代替饲养细胞,避免污染,减少工作步骤。






工作浓度:

1.  融合和亚克0隆阶段:10% (v/v) 加入到完全培养基中。

2.  细胞扩大培养和复苏阶段:2.5%-5% (v/v) 加入到完全培养基中。

注意:Hybridoma Feeder 添加因子适用的基础培养基为RPMI 1640、IMDM和DMEM,其它培养基未经测试。Hybridoma Feeder 添加因子不可代替血0清使用,只作为细胞培养添加剂使用。





动物细胞融合与单克0隆抗0体的模拟试0题。科学家用小鼠骨0髓瘤细胞与某种细胞融合,得到杂交细胞,经培养可产生大量的单克0隆抗0体,与骨0髓瘤细胞融合的是( )D. 筛选杂交资金积累细胞,并从中选出能产生...单克0隆抗0体杂交瘤细胞筛选技术 ,您get了吗?

单克0隆抗0体杂交瘤细胞筛选技术 ,您get了吗?只有骨0髓瘤细胞与B细胞相互融合的杂交瘤细胞,既具有B细胞的S途径,又具有骨0髓瘤细胞在体外...单克0隆抗0体





5.2 1X BSA 封闭液:

杂交瘤筛选:稀释浓缩 BSA 稀释/封闭液(1ml 浓缩 BSA 稀释/封闭液+9ml 蒸馏水)

其它检测:稀释浓缩 BSA 稀释/封闭液(1ml 浓缩 BSA 稀释/封闭液+9ml 蒸馏水)

注意:如果在 10X 中出现结晶,加热到室温或 37℃混匀并再溶解。

5.3 1X 洗涤液:

浓缩洗涤液 20 倍稀释(1ml 浓缩洗涤液+19ml 蒸馏水)。稀释的洗涤液室温稳定至少

6 个月。

5.4 二抗工作液:

二抗浓缩液浓度为 0.1mg/ml,2~8℃稳定至少 1 年,使用前用 1X BSA 稀释/封闭液稀释,对大多数实验而言,0.1~2.0μg/ml 工作浓度。

5.5 可溶性 TMB 单组分:直接使用。

5.6 终止液:直接使用。

5.7 标本

5.8 对照

6.实验优化

通过 3 个变量来优化 ELISA 条件: ***浓度、温度、孵育时间。一般情况下,室温反应对大多数实验能够得到很好的结果。 优化不同***浓度和不同孵育时间,选择***佳的实验条件。在优化***佳浓度时,第yi一个 ***倍比稀释,然后第二个***倍比稀释,每一孔都对应于第yi个***和第二个***的某一个稀释度的组合。



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