HRP-小鼠抗大鼠IgG1 *诚信企业「博特龙」
作者:博特龙2022/1/28 13:30:15






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博奥龙公司主要产品有抗0体制备***产品、病毒包装相关产品、2万多种科研用抗原抗0体、1200多种二抗,涵盖20多个物种和HRP、Biotin、FITC、AU、PE、Dylight、Alexa Fluor、Cy3、Cy5、 AMCA、TRITC、Texa Red等标记二抗;品类齐全的内参标签抗0体;另有WB、IHC、ELISA、细胞培养相关***及诸多特色产品和特色技术服务。



β-actin的蛋白水平通常不会发生改变,因此被广泛用于Western时上样量是否一致的参照。也常被用于免0疫染色观察细胞的微丝结构。在用作Western的参照时,Actin抗0体和Tubulin抗0体的主要不同之处在于两者所识别蛋白的分子量不同,这样可以选择合适的参照在同一块胶同一张膜上实现同时检测目标蛋白和参照蛋白。

保存条件:

      Actin抗0体-20℃保存,Western一抗稀释液-20℃或4℃保存,一年有效。Western一抗稀释液优先推荐4℃保存,长期不使用可以考虑-20℃保存,但冻融可能会导致出现轻微的浑浊和少量不溶物。


实验步骤:

1、弃去板内液体,洗板5遍后在不掉纤维的吸水材料上拍干或机洗5遍。再在每个标本的6孔中分别加入6种酶标二抗各100μl,通用阳性、阴性对照的各孔也一样。在加样图上或酶标板上做好标记。贴上封板膜37℃温育30分钟。

2 、吸弃板内液体,洗板5遍后在不掉纤维的吸水材料上拍干或机洗5遍。每孔分别加入显色剂 A 和显色剂 B 各50μl,换一张新的封板膜贴板避光37℃显色20分钟。

3 、ELISA***盒特异性好一般肉眼即可观察出结果,看显色蓝的那个孔所对应的酶标二抗就知道此标本的 Ig 类或亚类。更可将反应终止液(每孔50μl)终止反应后用酶0标仪450nm 测长,630nm 参考波长双波长测定结果,参看高值孔所对应的酶标二抗就知道此标本的 Ig 类或亚类(阳性对照 OD 一般不小于0.8,阴性对照一般不高于0.15,阳性判定标准:样品 OD 大于阴性 OD+0.15,阴性 OD 低于0.05按0.05算)。



水佐剂是一种用于制备小鼠单克0隆抗0体和多克0隆抗0体的免0疫佐剂,与常规使用的弗氏佐剂相比,具有免0疫针次少、抗原用量低、抗0体产生快、抗0体滴度高、抗0体亲合力高、不***抗原天然构象和使用方便等优点。

水佐剂使用重要提示

1、水佐剂只需两针免0疫,无论是用于单克0隆还是多克0隆抗0体制备,与弗氏佐剂相比可至少减少两针次免0疫。

2、水佐剂通过减少免0疫针次和降低每针次抗原用量,从而可大大节省总抗原用量。推荐使用的抗原用量为
(1)免0疫原性较弱的亚单位蛋白每针次1~50μg(通常为10~20μg);

(2)免0疫原性较强的灭活全病毒和病毒样颗粒每针次0.1~10μg(通常为1~2μg)。

3、水佐剂抗0体产生快,抗0体滴度高,抗0体亲合力高,无论是用于单克0隆还是多克0隆抗0体制备,只需要在三周内进行两针免0疫,通常在第五周即可获得ELISA滴度高1:10000~1:10000000的高亲合力抗0体水平。


***球蛋白不是的

  首先,丙种球蛋白注入***后产生的力是被动给予的,不是自身主动产生的,一般2周就被排泄,之后体内丙种球蛋白的含量又***到原来水平,要长期保持体内所含丙种球蛋白的高水平,就必须每隔2周***1次。

  其次,应用丙种球蛋白有一定的适应症,因为该药随所含抗0体量的不同而预防效果各异。普通的丙种球蛋白主要用于预防、甲肝、流行性等,想用丙种球蛋白来预防各种***是不可能的。

  第三,如果反复***丙种球蛋白,因其本身可作为抗原,刺激***产生一种对抗丙种球蛋白的抗0体,即抗抗0体,一旦再***丙种球蛋白,就会被抗抗中和,不能发挥其抗病作用。


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