小鼠抗鸡IgY IgG品牌企业 博特龙公司
作者:博特龙2022/1/22 9:41:43






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博奥龙公司主要产品有抗0体制备***产品、病毒包装相关产品、2万多种科研用抗原抗0体、1200多种二抗,涵盖20多个物种和HRP、Biotin、FITC、AU、PE、Dylight、Alexa Fluor、Cy3、Cy5、 AMCA、TRITC、Texa Red等标记二抗;品类齐全的内参标签抗0体;另有WB、IHC、ELISA、细胞培养相关***及诸多特色产品和特色技术服务。



实验步骤:

1 、首先将ELISA***盒***室温(大约30分),然后用纯水把清洗液配成工作浓度(1份浓缩清洗液加19份纯水)。

2 、取出酶标板。每个标本需要6孔,阳性对照6孔,阴性对照6孔。多余的用自封袋保存,记得放入干燥剂。

3 、将标本检测孔每孔先加入标本稀释液各50μl。然后将50μl 细胞培养上清(或特异亲和纯化的抗0体)再加入酶标微孔板,每个标本加6孔;阳性对照和阴性对照孔不加标本稀释液也是各加6孔每孔100μl。贴上封板膜37℃温育30分钟。



水佐剂免0疫步骤

步骤一:用生理盐水将抗原稀释到2倍***终浓度。备注:推荐使用的抗原用量为(1)免0疫原性较弱的亚单位蛋白每针次1~50μg(通常为10~20μg);(2)免0疫原性较强的灭活全病毒和病毒样颗粒每针次0.1~10μg(通常为1~2μg)。

步骤二:充分混匀佐剂,无菌条件下取出所需量与抗原按体积比1:1迅速混匀。备注:本佐剂产生沉淀属正常现象,与抗原混合操作越快越好。

步骤三:通过后腿小腿肌肉***免0疫小鼠,每只小鼠100μl。备注:本佐剂与抗原混合后产生沉淀属正常现象,抽入针管前应充分混匀,抽入针管后应尽快***。

步骤四:第21天按同样方式加强免0疫一针。备注:每次佐剂和抗原现配现用。

步骤五、第35天采微量尾血进行ELISA测定,抗0体滴度应在1:10000~1:10000000 范围内, 随后即可摘眼球采全血或进行脾细胞融合。备注:若极偶尔情况下抗0体滴度达不到实验需求,可在第42天再按同样方式加强免0疫一针。


如果机体内B细胞缺失或减少,***因缺乏抗0体往往反复出现微生物所致的,常引起脓皮病、化脓性、、气管炎和等;患的人,IgG、IgA都有一定的;患慢性淋巴细胞性的人则屯IgA和IgM降低。

B细胞和T细胞一样,在未接触抗原之前,不能产生效应。必须受到抗原刺激,并在辅助T细胞和巨噬细胞协助下,经过抗原与抗原受体相互识别,D细胞进入状态,通过增殖转变为有效应的浆细胞后,才能产生抗0体。




天然抗0体不仅包括针对病原微生物及其产物的抗0体,也包括针对非病原性物质的抗0体,如血型抗0体。除血型抗0体主要是受遗传因素的影响外,其余的天然抗0体可能是因隐性或因受共同抗原刺激而产生的。由于人或动物在出生后总是不断地接触各种抗原,所以有人认为天然抗0体的产生与***、食物、花粉或***的刺激有关。因此,“天然”二字的使用并不确切,仅是习惯用法。在一个地区内,天然抗0体的平均水平对诊断***有一定的参考价值。






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