兔抗大鼠IgG(H+L)推荐「博特龙」
作者:博特龙2022/1/17 16:59:55






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博奥龙公司主要产品有抗0体制0备全套产品、病毒包装相关产品、2万多种科研用抗原抗0体、1200多种二抗,涵盖20多个物种和HRP、Biotin、FITC、AU、PE、Dylight、Alexa Fluor、Cy3、Cy5、 AMCA、TRITC、Texa Red等标记二抗;品类齐全的内参标签抗0体;另有WB、IHC、ELISA、细胞培养相关试剂及诸多特色产品和特色技术服务。



Western Blot-抗0体检测技术服务?

一、服务内容

1、从动物细胞、人或动物组织、细菌、植物等样品中提取蛋白,重组蛋白、血0清、培养上清等样品

2、对样品中蛋白进行半定量分析

3、Western blot检测

(1) 电泳:聚丙0烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)分离蛋白样品

(2) 湿法转印(BLOTING:Tank Transfer)

(3) 杂交:用抗0体鉴定膜上的特定蛋白(INCUBATION: Antibody)

(4) 化学发光检测(ECL),胶片曝光,TotalLab Quant软件读取IOD值(可选)





1、预实验及正式实验服务:帮助客户设计样品上样顺序以符合论0文发表要求

2、免费进行蛋白内参检测(所有内参抗0体均免费提供)


样品要求

1、细胞>1×107;组织>30mg;细菌湿重>1mg;植物>100mg;血0清>50ul;等

2、样品蛋白浓度>1mg/ml,蛋白量>200ug/样品

客户提供材料

1、新鲜或正确保存的样品(按照我们的要求提供)

2、目的蛋白一抗:我们可以给客户免费提供抗0体查找服0务

3、阳性对照样品(尽量提供)

4、相关文献(可选)

提交给客户结果

1、预实验曝光结果(胶片及扫描图),预实验采取3个一抗稀释度

2、正式实验曝光结果(胶片及扫描图)

3、完整实验报告

4、IOD值分析报告(可选)






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水佐剂免0疫步骤

步骤一:用生理盐水将抗原稀释到2倍zui终浓度。备注:推荐使用的抗原用量为(1)免0疫原性较弱的亚单位蛋白每针次1~50μg(通常为10~20μg);(2)免0疫原性较强的灭活全病毒和病毒样颗粒每针次0.1~10μg(通常为1~2μg)。

步骤二:充分混匀佐剂,无菌条件下取出所需量与抗原按体积比1:1迅速混匀。备注:本佐剂产生沉淀属正常现象,与抗原混合操作越快越好。

步骤三:通过后腿小腿肌肉注射免0疫小鼠,每只小鼠100μl。备注:本佐剂与抗原混合后产生沉淀属正常现象,抽入针管前应充分混匀,抽入针管后应尽快注射。

步骤四:第21天按同样方式加强免0疫一针。备注:每次佐剂和抗原现配现用。

步骤五、第35天采微量尾血进行ELISA测定,抗0体滴度应在1:10000~1:10000000 范围内, 随后即可摘眼球采全血或进行脾细胞融合。备注:若极偶尔情况下抗0体滴度达不到实验需求,可在第42天再按同样方式加强免0疫一针。

博奥龙公司主要产品有抗0体制备全套产品、病毒包装相关产品、2万多种科研用抗原抗0体、1200多种二抗,涵盖20多个物种和HRP、Biotin、FITC、AU、PE、Dylight、Alexa Fluor、Cy3、Cy5、 AMCA、TRITC、Texa Red等标记二抗;品类齐全的内参标签抗0体;另有WB、IHC、ELISA、细胞培养相关试剂及诸多特色产品和特色技术服务。

选择性培养

选择性培养的目的是筛选融合的杂交瘤细胞,一般采用HAT选择性培养基。在HAT培养基中,未融合的骨0髓瘤细胞因缺乏次黄 piao呤-鸟piao呤-磷酸核糖转移酶,不能利用补救途径合成DNA而死0亡。 未融合的淋巴细胞虽具有次黄 piao呤-鸟piao呤-磷酸核糖转移酶,但其本身不能在体外长期存活也逐渐死0亡。 只有融合的杂交瘤细胞由于从脾细胞获得了次黄 piao呤鸟piao呤磷酸核糖转移酶,并具有骨0髓瘤细胞能无0限增殖的特性,因此能在HAT培养基中存活和增殖。


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