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1.建议提供目的蛋白阳性表达样品(纯蛋白、有阳性表达的细胞或***、商品化的阳性对照产品等)作为阳性对照
2.免费内参检测为:beta-actin,beta-tubulin,GAPDH,Histone H3, Lamin B1等
3.如需进一步数据分析:TotalLab Quant专0业软件读取IOD值、条带的Normalization处理、以及发表论0文时所用条带的处理,请另询价
4.对条带结果有特殊要求,请另询价
5.双方签订合同后,收取70%首付后启动预实验
6.WB特殊要求请咨询
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博奥龙公司主要产品有抗0体制备***产品、病毒包装相关产品、2万多种科研用抗原抗0体、1200多种二抗,涵盖20多个物种和HRP、Biotin、FITC、AU、PE、Dylight、Alexa Fluor、Cy3、Cy5、 AMCA、TRITC、Texa Red等标记二抗;品类齐全的内参标签抗0体;另有WB、IHC、ELISA、细胞培养相关***及诸多特色产品和特色技术服务。
注意事项:
1、Actin抗0体在Western实验后,注意回收稀释的抗0体。回收的抗0体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗0体,包括已经使用过的稀释抗0体,4℃保存。
2、 回收后重复使用的抗0体,使用方法同新鲜稀释的抗0体。如果在重复使用过程中发现抗0体出现轻微混浊现象,可以10000g离心1-3分钟,取上清用于后续检测。如果回收的抗0体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况,则可以考虑废弃该抗0体。
3、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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多抗制备的概念:由多个B淋巴细胞克0隆所产生的,受到多种抗原决定簇刺激并可与多种抗原表位结合的抗0体。多抗制备主要包括以下几个步骤:免0疫动物、佐剂、免0疫原、免0疫、取血等。
多抗制备的制备步骤
一、器材
剪刀(剪兔毛用)一把、弯头眼0科***镊子(游离血管用)一把、直头眼0科***剪(剪血管用)一把,***刀架,***刀片,注0射器(1ml、10ml,25ml)附针头,兔子固定架,灭菌三角烧瓶(200ml)或平皿(直径18cm)、弯头止血钳四把,直头止血钳两把,***缝合线,塑料放血管,纱布等。
二、***
生理盐水
弗氏完全佐剂
弗氏不完全佐剂
二甲0苯,酒精棉,脱脂棉,2% NaN3
三、免0疫原:蛋白或KLH偶联的多肽。每次免0疫100-200μg免0疫原。
四、兔子的选择
兔子的重量应在四斤以上,两耳光滑,明显可见耳静、动脉,健康。
五、免0疫
用生理盐水稀释免0疫原,然后与相应的佐剂进行1:1混合。抗原和佐剂完全混合形成稳定的乳剂,将该乳剂在兔子双肩周围的皮肤下进行皮下0***和后大腿进行肌肉***。每个区域大约用1/4的免0疫原。这样免0疫原可以持久存在从而提高免0疫应答。
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