4-8℃保存

本产品是次黄piào呤和胸腺嘧0啶核苷的混合物，适用于杂交瘤筛选和细胞培养应用。

HT培养基添加剂（HT  Supplement），是次磺piào呤（Hypoxanthine，10mmol/L）和胸腺嘧0啶核苷（Thymidine，1.6mmol/L）的混合剂，

用培养液稀释，作为DNA补救合成途径的补充剂用于杂交瘤筛选培养基的添加剂和营养添加剂以克服细胞内残留氨基喋呤（Aminopterin）

对DNA经典合成途径的***作用。HT培养基（HT  Supplement）为无菌透明溶液，经0.1μm微孔滤膜过滤。

杂交瘤融合筛选：

杂交瘤技术杂交瘤技术，又称为单克0隆抗0体技术，是获得单克0隆抗0体的主要技术之一，是将免0疫动物的 B 淋巴细胞与骨0髓瘤细胞融合，可以得到既能产生抗0体又能无0限增殖的杂交瘤细胞，利用杂交瘤细胞可以大量的生产单克0隆抗0体，因其具有高度专一性和靶向性，单克0隆抗0体已广泛应用于科学研究、诊断0***和治0疗。

检测抗原或抗0体

3.2.1 直接 ELISA：是检测抗原的***简单方法，包被抗原，加标记的检测抗0体。

3.2.2 间接抗0体 ELISA: 可以检测抗原或抗0体，取决于哪种是未知的。包被抗原，加一抗或含抗0体的血0清或fu水，***常用于检测动物特异性抗0体的水平，也可用于检测杂交瘤培养上清中的单克0隆抗0体。

3.2.3 双抗0体夹心法：是检测抗原的一种高度敏***的方法。用高度纯化的抗0体分别作为包被抗0体和检测抗0体，检测抗0体可直接标记酶，如果包被抗0体和检测抗0体不是来源同种动物，检测抗0体也可不标记，而加针对检测抗0体动物种属的酶标二抗，此法适用于抗原浓度过低，不能直接包被到酶标板上或者含有未知成分干扰的抗原检测。

检测条件概述

4.3.1 包被酶标板

多种包被条件：抗原或抗0体浓度、pH、离子强度、温度和孵育时间都影响包被效率。 此外，结合蛋白的数量与分子量成反比。***盒中包被液为优化的磷酸盐缓冲液，适用于大多数抗原和抗0体的包被。微孔板应选择专0用于 ELISA 的酶标板，不建议使用***培养板。包被时，抗原或抗0体在包被缓冲液中稀释后加入到酶标板中室温孵育，尽可能使用***纯的抗原或抗0体。一般来说 1～10μg/ml 室温 1 小时能够包被饱和。为方便，2～8℃过夜可以到满 意的包被效果。 包被后，酶标板用 BSA 稀释/封闭液封闭 45 分钟，稀释/封闭液中含3%BSA，能够通过封闭未反应部位减少非特异性结合并保护包被上的蛋白质活性。如果暂时不继续实验，可以 用塑料膜覆盖酶标板后冷藏保存，需要时再***室温继续实验。