细胞冻存步骤

1. 常规方法收集对数期的贴壁细胞或悬浮细胞于试管中。

2. 根据培养细胞的密度和冻存管的大小确定所需冻存细胞数。

3. 将所需数目的细胞悬浮液置于离心管中，1000rmp，5分钟离心收集培养细胞沉淀，彻0底弃去离心管中的上清液。

4. 加入适量的CELLS***ING?细胞冻存液于离心管中，使细胞浓度约为5×105-1×107/ml。轻柔地混匀细胞，制成细胞混合液。

5. 将离心管中的细胞混合液分装于已标记的冻存管中，建议每管1ml或1.5ml。

6. 直接将分装好的细胞冻存管放入-80℃超低温冰箱中，可长期冷冻保存。

7. 如果想液氮中长期保存，需先放入-80℃冰箱至少一天时间，方可移至液氮罐中保存。

产品特性

l 无动物源成分，无各类病毒、霉菌和支原体等污染的可能性

l 热源水平低于药典标准1/10，减少外源内毒0素干扰

l 无血0清成分，所有成分均为原0料药级别，极大降低批次间差异

l 冻存细胞复苏率高达90%

l 即用型产品，无需程序降温,冻存于-80℃冰箱或液氮中长期保存

操作方法

选择对数生长期的细胞冻存，有助于提高细胞复苏存活率。

1.1按照常用方法悬浮细胞或贴壁细胞收集于离心管中。

1.2 1000rpm-1500rpm，5min离心，弃上清液。

1.3加入适量的Serum-Free细胞冻存液于离心管中，推荐细胞冻存浓度为 1×106 - 1×107 cells/ml。缓慢混合均匀，制成细胞悬液。

1.4将离心管中的细胞混合液分装于已标示完全的冷冻保存管中。

1.5直接将冻存细胞放入-80℃冰箱，24h后转入移至-196℃液氮罐长期冷冻保存。

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