无血0清冻存液使用方法:
1、收集悬浮细胞或贴壁细胞,离心去除上清培养液。
2、加入适量的细胞冻存液,重悬细胞,调节密度至1-5x10*↑/mL。
3、将加有冻存液的细胞悬液分装至冻存管中。
4、将冻存管直接转移至-80C水箱中冷冻保存。
5、储存条件:2-8C保存,年有效: -20C保存,两年有效。
无血0清冻存液注意事项:
1、请选择对数生长期细胞进行冻存。
2、冻存液加入细胞后,请尽快放入-80C冰箱冻存。
3、本产品冻存细胞可以在-80°C冰箱保存3年以上。
4、若需长期冻存细胞,请转移至液氮罐中贮存。
5、冻存液中含DMSO成分,为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套。
产品简介
无血0清细胞冻存液,通用于人和各种动物细胞株。特别配方(主要成分为DMSO和氨基酸)具有有效提高细胞冻存活率和复苏活力。不含动物来源性蛋白,能减少各类病毒、霉菌和支原体等的污染,确保冻存细胞安全。既适用于一般培养细胞的冻存,也适用于无血0清培养细胞和蛋白表达细胞的冻存。
产品特色
·不含动物源成分,病毒、霉菌和支原体等污染可能性低,各批产品之间有更高的产品质量一致性。
·成分明确,无批次差异。
·可直接存放于-80℃冰箱冻存,无需经过费时的程序降温过程(省时、省力、省钱)。
配方有效提高细胞冻存存活率及复苏率
即用型,无需现配,即开即用
通用型,适用于冻存各种细胞系,原代细胞
可微量,原位冻存,例如杂交瘤细胞的冻存,省时高0效
存储条件
储存于4℃以下,质量保障期从产品的生产日期起,为期两年。3个月以上没有使用冻存液计划时,尽可能-20℃冷冻保存。为避免重复冻融过程可能导致的冻存液品质下降和性能降低,推荐将产品分装成小管后,再存放于4℃以下或-20℃冰箱冻存。
冻存细胞复苏步骤:
1、 从冰箱中取出冻存的细胞,立即置于37℃水浴槽中快速解冻。
2、 待冻存管中的细胞混合液完全融化后,立即加入1ml细胞培养基于冻存管中与细胞混合,将其中的混合液移至含有约5ml该细胞培养基的离心管中,1000rmp离心5分钟,收集冻存细胞沉淀,移去上清液(注意勿将细胞沉淀倒掉)。
3、 加入适量的新鲜培养基,使用移液管缓缓加入细胞沉淀中,轻柔混匀,将混匀好的细胞移至事先准备好的培养容器中。
4、 镜检观察,待细胞状态***后可进行其他研究或者培养处理。
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使用方法
1. 用37℃水浴解冻细胞冻存液,并上下振荡数次混匀。
备注:为了尽量减少污染,未使用完的细胞冻存液***好冻回-20℃,反复冻融不影响使用效果。有沉淀
属于正常情况,主要为DMEM高糖培养基中的脂类与盐类的析出。
2. 用细胞消化液将生长良好的细胞消化成单细胞,并用细胞计数器或血球计数板计数细胞浓度。
备注:悬浮细胞不需要消化但仍需要细胞计数,不易消化成单细胞的各种293细胞等***好使用含有EDTA
的胰酶进行消化。
3. 用低速离心沉淀细胞,弃去上清。
备注:通常2000~3000rpm离心5~10min即可。
4. 用适量细胞冻存液重悬细胞。
备注:细胞浓度可根据情况调整为1~5×106/ml,通常为3×106/ml左右。
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