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服务项目说明

客户要求加可***marker的，需事先说明，并按照可***项目收费

1、提供的蛋白量与目的待检测的蛋白数量有关，蛋白数量增加相应的样品量也要增加

2、胞浆、胞核蛋白抽提样品来源为：哺乳动物细胞、动物***。如果1个样品分别提取胞浆、胞核蛋白后，蛋白定量时以2个样品计算

3、每张膜样品数量为1-8个，不足8个以8个收取。9-16个样品为2张膜，17-24个样品为3张膜；以此类推

举例：7个样品，1个目的蛋白，算1张膜；有9个样品，1个目的蛋白，算2张膜

     7个样品，2个目的蛋白，算2张膜，有9个样品，2个目的蛋白，算4张膜

以上为一般算法。如果客户样品数量需要按照组别等来进行上样时需要重新确定每张膜的上样量及膜的张数

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博奥龙公司主要产品有抗0体制备***产品、病毒包装相关产品、2万多种科研用抗原抗0体、1200多种二抗，涵盖20多个物种和HRP、Biotin、FITC、AU、PE、Dylight、Alexa Fluor、Cy3、Cy5、 AMCA、TRITC、Texa Red等标记二抗；品类齐全的内参标签抗0体；另有WB、IHC、ELISA、细胞培养相关***及诸多特色产品和特色技术服务。

注意事项：

1、Actin抗0体在Western实验后，注意回收稀释的抗0体。回收的抗0体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗0体，包括已经使用过的稀释抗0体，4℃保存。

2、 回收后重复使用的抗0体，使用方法同新鲜稀释的抗0体。如果在重复使用过程中发现抗0体出现轻微混浊现象，可以10000g离心1-3分钟，取上清用于后续检测。如果回收的抗0体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况，则可以考虑废弃该抗0体。

3、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

水佐剂免0疫步骤

步骤一：用生理盐水将抗原稀释到2倍***终浓度。备注：推荐使用的抗原用量为（1）免0疫原性较弱的亚单位蛋白每针次1~50μg（通常为10~20μg）；（2）免0疫原性较强的灭活全病毒和病毒样颗粒每针次0.1~10μg（通常为1~2μg）。

步骤二：充分混匀佐剂，无菌条件下取出所需量与抗原按体积比1:1迅速混匀。备注：本佐剂产生沉淀属正常现象，与抗原混合操作越快越好。

步骤三：通过后腿小腿肌肉***免0疫小鼠，每只小鼠100μl。备注：本佐剂与抗原混合后产生沉淀属正常现象，抽入针管前应充分混匀，抽入针管后应尽快***。

步骤四：第21天按同样方式加强免0疫一针。备注：每次佐剂和抗原现配现用。

步骤五、第35天采微量尾血进行ELISA测定，抗0体滴度应在1:10000~1:10000000 范围内，　随后即可摘眼球采全血或进行脾细胞融合。备注：若极偶尔情况下抗0体滴度达不到实验需求，可在第42天再按同样方式加强免0疫一针。