小鼠抗鸡IgY IgG常用解决方案「多图」
作者:博特龙2021/12/14 5:22:14






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博奥龙公司主要产品有抗0体制备***产品、病毒包装相关产品、2万多种科研用抗原抗0体、1200多种二抗,涵盖20多个物种和HRP、Biotin、FITC、AU、PE、Dylight、Alexa Fluor、Cy3、Cy5、 AMCA、TRITC、Texa Red等标记二抗;品类齐全的内参标签抗0体;另有WB、IHC、ELISA、细胞培养相关***及诸多特色产品和特色技术服务。

1、一次没用完的板子要带干燥剂放自封袋封好,随盒存放。

2、拿放板子时不要剧烈抖动,以免孔间交叉污染出现错误结果。

3、本***一般不会出现两个阳性,但出现两个阳性的现象不论在进口或国产***中都是真实存在的,一般会一个 OD 很高,另一个很低但却还能判为阳性,实验分析表明这种情况下以 OD 高值孔为准,出现这种情况有多重原因:
(1)培养的细胞中有饲养细胞残留,
(2)抗0体本身存在变异,
(3)样品为非特异亲和纯化的抗0体或样品是腹0水,
(4)上清出现少量污染,
(5)实验操作粗放,
(6)加错***。

4、通用阳性对照数据并不一定完全一样,仅作为***有效指示。


1、水佐剂不***抗原天然构象,从而易于筛选获得针对构象型抗原表位的单克0隆抗0体,这是弗氏佐剂所不具备的一个重要特点。

2、水佐剂是一种水溶性佐剂,使用时不需要弗氏佐剂的复杂乳化过程,抗原和佐剂只需简单混合即可用于免0疫动物。

3、水佐剂使用肌肉免0疫途径,与常规小鼠单克0隆抗0体制备过程中使用足垫免0疫或脾内免0疫相比,极大地方便了使用。

4、水佐剂的***重要用途是可方便地用于制备小鼠多克0隆抗0体。常规多克0隆抗0体制备多使用兔子,不但免0疫针次多、抗原用量大和抗0体产生慢,而且由于技术要求较高而往往需要委托外单位制备。使用快速水溶免0疫佐剂,任何动物实验人员均可方便快速地制备小鼠多克0隆抗0体,只需要简单地免0疫5只小鼠,即可在五周后获得1ml高质量的小鼠多克0隆抗0体。

5、水佐剂建议室温运输,2~8oC保存,无菌取用,有效期6个月。

注:

抗原***以前需要收集一些正常血0清,已备检测抗0体时作为阴性对照。待兔子在新环境中稳定,大概需要四天左右时间,可以进行耳动脉取血。取血量约5ml足矣。

免0疫用的抗原必须纯化,否则影响抗0体的质量。抗原经FCA或FIA充分乳化后才能***。将抗原液与佐剂等比例混合后,置于混合器上使之剧烈振荡使抗原充分乳化,乳化过程比较费时、费力,但若乳化不充分,会影响免0疫的效果,振荡后,1000rpm离心一分钟,如水相和油相不分层即可***。首0次免0疫用FCA,以后都用FIA。

免0疫方法可采用背部多点***法。即于家兔脊柱两旁选4-6点皮下0***,每点注0.1ml,间隔2周后再于上述部位选不同点***(不要选择临近位点,否则***愈合不好)。每次免0疫的抗原量约100μg。免0疫次数在四五次即可,抗原用量大可以减少次数。


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