QuickAntibody系列免0疫佐剂有哪些特点？

与常规使用的弗氏佐剂相比，QuickAntibody免0疫佐剂具有免0疫周期短、针次少、无需乳化、抗原用量低、抗0体滴度高、抗0体亲合力高、易获得构象型表位的抗0体等多方面优点，详述如下：

1.    QuickAntibody只需两针免0疫，无论是用于单克0隆还是多克0隆抗0体制备，与弗氏佐剂相比可减少免0疫针次。

2.    QuickAntibody通过减少免0疫针次和降低每针次抗原用量，从而可大大节省总抗原用量。推荐使用的抗原用量为（1）免0疫原性较弱的亚单位蛋白抗原每针次5-50μg（通常为小鼠5-20μg，

兔子20-50μg）；（2）免0疫原性较强的灭活全病毒或全***以及病毒样颗粒抗原每针次1-10μg（通常为小鼠1-5μg ，兔子5-10μg）。

综上所述，新的改良的小鼠免0疫方法具有很好实验效果。孕妇血0清AFP水平的变化与唐氏***有密切关系。目前孕中期人绒毛膜促性腺激0素(HCG)联合AFP筛查唐氏***胎儿已成为欧美亚许多***常规服务项目之一，在假阳性率为5％左右情况下，这种筛查方案对唐氏***的检出率可以达65％～75％[9-11|。因而免0疫方法测定血0清中AFP浓度已在临床得到广泛应用。羊水和母体血0清中AFP浓度的升高，对胎儿***管缺陷和其他遗传缺陷的产前诊断，也具有应用价值。在大多数原发性肝细胞***和内胚窦***患者血0清中AFP浓度升高，检测AFP有助于肿0瘤的早期诊断，也是在治0疗过程中观察疗0效的一项指标。采用本实验新改进的方法制备AFP—McAb，对胚胎发育、***变过程中***表达、AFP的纯化、肝0***的导向治0疗以及提供诊断0***等都有重要的实际应用意义。

杂交瘤细胞的筛选与克0隆

细胞融合后，培养于添加了 HAT 的选择培养基的 96 孔板中，培养一天后半定量换液，培养基更换时应注意轻缓，第 5 天能在显微镜下看到明显的杂交瘤细胞克0隆，第 7 天左右，杂交瘤细胞能长至铺满孔底约 1 /10。此时进行 ELISA 检测养心细胞孔。取细胞培养上清对 MRJ 融合蛋白进行间接 Elisa检测，筛选出能分泌抗0体的杂交瘤细胞孔，有限稀释法对阳性孔进行亚克0隆，经过 3 次亚克0隆后，获得了能够稳定 分 泌 抗 MRJ 融合蛋白单克0隆抗0体的细胞株。对杂交瘤细胞株按从 96 孔板-24 孔板-10 cm 培养皿的顺序扩大培养，部分细胞用于腹0水制备单抗，部分细胞冻存备用。

原理

新型乳剂是一种具有自主知识产权、独0特配方的新型油包水佐剂，用于免0疫小鼠和家兔等实验动物以制备单、多克0隆抗0体。该佐剂以弗氏不完全佐剂为基础，添加了多种具有强免0疫刺激0活性的TLR配体。新型佐剂与常规使用的弗氏佐剂相比，具有以下优点：

（1）新型乳剂活性强于弗氏不完全佐剂；

（2）与弗氏完全佐剂不同，不含有干扰免0疫应答的无关蛋白成分；

（3）安全性好，副反应率低；

（4）免0疫针次少、抗原用量低等多方面优点。