转染(transfection)指真核细胞由于外源DNA掺入而获得新的遗传标志的过程。DNA转染技术的发展对现代分子生物学产生了巨大的影响。***转染技术不仅是研究转0***和***表达的重要工具,而且是***治0疗的关键步骤。理想的***转染***应该具有如下特点:高0效转染;安全;低细胞毒性;方法简单;省时、经济。
哺乳动物的转染技术在60年代末70年代初即已引入。
将外源DNA 导入哺乳动物细胞的方法大致可分为两大类,即生物方法和物理化学方法。物理化学方法中常用的有磷酸钙法、显微***、电穿孔、脂质体介导的转染,以及***近出现的以高分子聚合物为载体的***传递技术。生物方法则主要是以病毒作为载体,通过病毒感0染的方式将外源DNA 导入到细胞中, 其中以逆转录病毒及腺病毒转染系统***为常用。
以高分子聚合物为载体的***传递技术正成为人们研究的方向。但应用的阳离子聚合物转染***,仍然存在转染效率不高和细胞毒性的问题。***新的高分子聚合物转染***是纳米聚合物转染***,由于采用新技术和新材料,具有高0效、安全、低细胞毒性。其原理是:分子内含有许多氨基,在生理PH下会发生质子化,这些质子化的氨基可以中和DNA质粒表面的负电荷,使DNA分子由伸展结构压缩为体积相对较小的DNA粒子,并包裹在其中,使DNA免受核酸酶的降解。转染复合物主要是通过细胞内吞作用将DNA转移进入细胞,形成内含体(endosome),DNA从内含体释放,进入细胞质中,再进一步进入核内转录、表达。通过纳米技术生产出的转染***在纳米尺度表现出结合保护DNA能力强、毒性低的独0
特性能。