无血0清冻存液使用方法:
1、收集悬浮细胞或贴壁细胞,离心去除上清培养液。
2、加入适量的细胞冻存液,重悬细胞,调节密度至1-5x10*↑/mL。
3、将加有冻存液的细胞悬液分装至冻存管中。
4、将冻存管直接转移至-80C水箱中冷冻保存。
5、储存条件:2-8C保存,年有效: -20C保存,两年有效。
无血0清冻存液注意事项:
1、请选择对数生长期细胞进行冻存。
2、冻存液加入细胞后,请尽快放入-80C冰箱冻存。
3、本产品冻存细胞可以在-80°C冰箱保存3年以上。
4、若需长期冻存细胞,请转移至液氮罐中贮存。
5、冻存液中含DMSO成分,为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套。
产品特性
l 无动物源成分,无各类病毒、霉菌和支原体等污染的可能性
l 热源水平低于药典标准1/10,减少外源内毒0素干扰
l 无血0清成分,所有成分均为原0料药级别,极大降低批次间差异
l 冻存细胞复苏率高达90%
l 即用型产品,无需程序降温,冻存于-80℃冰箱或液氮中长期保存
操作方法
选择对数生长期的细胞冻存,有助于提高细胞复苏存活率。
1.1按照常用方法悬浮细胞或贴壁细胞收集于离心管中。
1.2 1000rpm-1500rpm,5min离心,弃上清液。
1.3加入适量的Serum-Free细胞冻存液于离心管中,推荐细胞冻存浓度为 1×106 - 1×107 cells/ml。缓慢混合均匀,制成细胞悬液。
1.4将离心管中的细胞混合液分装于已标示完全的冷冻保存管中。
1.5直接将冻存细胞放入-80℃冰箱,24h后转入移至-196℃液氮罐长期冷冻保存。
细胞复苏操作方法
2.1从液氮罐取出冻存细胞,立即放入37℃水浴锅或其他细胞复苏设备中,快速融化。
2.2准备离心管,加入2倍冻存细胞体积的细胞培养基,待冻存管中细胞完全融化后,将冻存细胞悬液缓慢加入离心管中。
2.3 1200-1500rpm 5min离心,弃上清。
2.4加入适量新鲜培养基,使用移液管缓慢悬浮细胞,并将细胞转染细胞培养皿/瓶中,显微镜下观察细胞状态,放入细胞培养箱中培养。
2.5 24h后观察细胞状态,并更换新鲜细胞培养液。
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