为啥要学习使用液相色谱柱?
色谱柱的使用和***:液相色谱仪由高压液体泵、检测器及液相色谱柱等三部分组成,其中液相色谱柱的正确安装和使用,是液相色谱工作的关键;也是液相色谱工作者获得正确可靠的实验数据的必经之路,建立液相色谱柱日常维护与***规程,保证能正常使用。
液相色谱柱的适用范围:
本规程适用液相色谱柱的维护与***。
责任人:
液相色谱柱使用者。
液相色谱仪中柱温箱有怎么的效果
液相色谱仪的柱温箱是在作业当中的,为了保证试验的顺利进行和终究数据的准确性,咱们有必要了解柱温箱究竟起着怎么的效果。
1、可以使保存时刻相对稳定,然后进步需要进行定性辨别的可信度;
2、保存时刻相对稳定是进行定量的根底,不一样的保存时刻不仅不能判别其成份的一致性,一起,因为保存时刻不一样峰面积也必将发生变化,其检查成果的可信度终将会遭到质疑。
3、温度低时,因流动相黏度添加而使检查时刻延伸,一起还也许添加真空泵的磨损,然后影响设备的使用寿命。
4、温度低的时分还因溶解度相对降低而呈现缓冲盐结晶而阻塞泵、进样阀、管道、色谱柱的现象。
5、温度低时还因溶解度降低使杂质吸附在填料上而难于洗脱,然后使得色谱柱的使用寿命缩短。
6、温差较大时,因保存时刻不稳必将添加检查作业不必要的费事。
液相色谱柱注意事项
色谱柱的正确使用和维护十分重要,稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。在色谱操作过程中,需要注意下列问题,以维护色谱柱。
① 避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。温度的突然变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况;柱压的突然升高或降低也会冲动柱内填料,因此在调节流速时应该缓慢进行,在阀进样时阀的转动不能过缓。
② 应逐渐改变溶剂的组成,特别是反相色谱中,不应直接从改变为全部是水,反之亦然。
③ 一般说来色谱柱不能反冲,只有生产者指明该柱可以反冲时,才可以反冲除去留在柱头的杂质。否则反冲会迅速降低柱效。
④ 选择使用适宜的流动相(尤其是pH),以避免固定相被***。有时可以在进样器前面连接一预柱,分析柱是键合硅胶时,预柱为硅胶,可使流动相在进入分析柱之前预先被硅胶“饱和”,避免分析柱中的硅胶基质被溶解。
⑤ 避免将基质复杂的样品尤其是生物样品直接注入柱内,需要对样品进行预处理或者在进样器和色谱柱之间连接一保护柱。保护柱一般是填有相似固定相的短柱。保护柱可以而且应该经常更换。
⑥ 经常用强溶剂冲洗色谱柱,清除保留在柱内的杂质。在进行清洗时,对流路系统中流动相的置换应以相混溶的溶剂逐渐过渡,每种流动相的体积应是柱体积的20倍左右,即常规分析需要50~75ml。
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