液相色谱法

液相色谱法的应用范围十分广泛，对样品的适用性广，不受分析对象挥发性和热稳定性的限制，几乎所有的化合物包括高沸点、极性、离子型化合物和大分子物质均可用液相色谱法分析测定，因而弥补了气相色谱法的不足。在目前已知的有机化合物中，可用气相色谱分析的约占20% ，而80% 则需用液相色谱来分析。HPLC因其具有分离效能高、分析速度快、检测灵敏度好、能分析和分离高沸点且不能气化的热不稳定生理活性物质的特点而被广泛应用于生***学、及临床分析，己将该法收载于药典。

液相色谱仪常见故障解决方案

如何排除液相色谱仪气泡溢出的故障？

流动相内产生都无法清除不断产生的气泡，主要是因为过滤器长期沉浸于铵等缓冲液内，过滤器内部由于霉菌的生长繁殖，形成菌团，阻塞了过滤器，缓冲液难以流畅地通过过滤器，空气在泵的压力作用下经过滤器进入流动相。处理过滤器浸泡于5%溶液中，超声清洗几分钟即可；亦可将过滤器浸泡于5%溶液中12～36小时，轻轻震荡几次，再将过滤器用纯水清洗几次，打开泄压阀，打开purge键清洗脱气，如仍有气泡不断从过滤器冒出，继续将过滤器浸泡于5%溶液中，如没有气泡不断从过滤器中冒出，说明过滤器内部的霉菌菌团已被***，流动相可以流畅地通过过滤器。打开泄压阀，打开泵，流速调至1.0～3.0ml/min，纯水冲洗过滤器1小时左右。即可将过滤器清洗干净。关闭泄压阀，纯冲洗半小时即可。

液相色谱法可以不做标准曲线吗？

首先要明确做标准曲线的目的，一般是为了含量测定作为标准品来用。液相色谱的浓度和峰面积成正比，样品的含量未知，浓度也就未知，峰面积可读。那么这时需要一个已知含量和已知峰面积的对照品。这个时候做不做标准曲线要看试验方法，有的方法是外标法，也就是和你样品浓度一样的对照品，平行配制两个，进样分析。有的方法是内标法，就需要样品中添加内标物。还有的面积化，那就什么对照都不要进了。方法要看你的质量标准，上面应该有计算方法，上面写的是什么，就按照什么来做。不是非标准曲线不可的。