液相色谱仪的使用注意事项

液相色谱仪对于多数人来说都是很好上手的仪器了，但是就算是用过几年、经验丰富的分析员都会习惯于一些错误的操作，经常导致一些仪器故障。今天小编就给大家讲讲在使用过程中的注意事项。

对于液相色谱仪器本身一般不会有问题，特别是刚买回来的新仪器。对于仪器本身重要的就是仪器的校验，刚买回来的仪器一般都是由卖家工程师先对仪器做系统的确认工作，确认顺利通过后，再请国家或省级仪器检定局的来校验，检定合格后就可以放心使用了，除此之外，一些做得好的公司每半年会对仪器进行一次的内部校验，目的就是为了保证仪器的正常可运行状态。

色谱条件一般包括流动相、色谱柱、检测波长、流速及进样量。流动相就涉及到配制流动相所用到的水和试剂试液，水一般要求用超纯水或其他水的电阻率不大于18.2兆欧级别，试剂试液要求用色谱级别的，原因为防止水和试剂试液中的杂质对色谱结果的干扰。色谱柱会因不同的品种而有不同的要求，但每根色谱柱都有它的清洗要求，这个在色谱柱说明书上都可以找到，一定要根据上面的要求进行，否则会造成色谱柱效下降和色谱柱的使用寿命缩短，检测波长也会因品种的不同有不同的要求。

液相色谱仪与气相色谱区别

液相色谱仪在基本原理上和气相色谱仪是一致的，所以设备的基础原理差不多，但是他们在检测方面是有不相同的地方的，有不相同的，但又有不同之处：液相色谱 与气相色谱的主要区别可归结于以下几点：

1、进样方式的不同：液相色谱仪只要将样品制成溶液，而气相色谱需加热气化或裂解；2、流动相的不同，在被测组分与流动相之间、流动相与固定相之间都存在着一定的相互作用力；

3、由于液体的粘度较气体大两个数量级，使被测组分在液体流动相中的扩散系数比在气体流动相中约小4~5个数量级；

4、由于流动相的化学成分可进行广泛选择，并可配置成二元或多元体系，满足梯度洗脱的需要，因而提高了液相色谱的分辨率（柱效能）；

5、液相色谱采用5~10Lm细颗粒固定相，使流体相在色谱柱上渗透性大大缩小，流动阻力增大，必须借助高压泵输送流动相；

6、液相色谱仪是在液相中进行，对被测组分的检测，通常采用灵敏的湿法光度检测器，例如，紫外光度检测器、示差折光检测器 、荧光光度检测器等；

7、液相色谱与气相色谱相比较，液相色谱同样具有高灵敏度、能和高速度的特点。

8、液相色谱的定性和定量分析，与气相色谱分析相似，在定性分析中，采用保留值定性，或与其他定强的仪器分析 法连用；在定量分析中，采用测量峰面积的化法、内标法或外标法等，但液相色谱在分离复杂组分式样时，有些组分常不能出峰，因此化法定量受到限制，而内标法定量则被广泛使用。

液相色谱仪色谱柱失效的原因

气相色谱原理 利用组分在气、液（固）两相间的分配系数不同而实现分离。 气相色谱的流动向为惰性气体，气-固色谱法中以表面积大且具有一定活性的吸附剂作为固定相。当多组分的混合样品进入色谱柱后，由于吸附剂对每个组分的吸附力不同，经过一定时间后，各组分在色谱柱中的运行速度也就不同。吸附力弱的组分容易被解吸下来，先离开色谱柱进入检测器，而吸附力的组分不容易被解吸下来，因此离开色谱柱。如此，各组分得以在色谱柱中彼此分离，顺序进入检测器中被检测、记录下来。二、组成 由五大系统组成：气路系统、进样系统、分离系统、温控系统、检测记录系统。

液相色谱柱样品制备

1、样品应当尽可能溶解在能与流动相相互溶的溶剂中。除特殊指明外，如使用强溶剂溶解样品柱子的分辨率将可能降低。

2、样品溶液在进样前应使用针头式过滤器对样品预先过滤。频繁改变流动相组成，会加速降低柱效。

3、色谱柱由高压匀浆法装填，能承受较高压力。为获得佳分离效果，使用时请不要超过200kgf，而且避免压力突然上升或变化，否则会造成硅胶填料的破坏，减少色谱柱的使用寿命。除特殊要求外高操作温度不要超过60℃。