液相色谱法概述
液相色谱法(HPLC)是上个世纪七十年代迅速发展起来的一项、快速的分析分离技术,是现代分离测试的重要手段。色谱法的分离原理是:溶于流动相(mobile phase)中的各组分经过固定相时,由于与固定相(station phase)发生作用(吸附、分配、排阻、亲和)的大小、强弱不同,在固定相中滞留时间不同,从而先后从固定相中流出。又称为色层法、层析法。
正相液相色谱
柱内填充有微小的二氧化硅颗粒和非极性溶剂,例如正己烷。典型柱的内径为4.6 mm或更小,长度为150至250 mm。混合物中的非极性化合物通过色谱柱的速度更快,因为极性化合物比非极性化合物在极性二氧化硅上的粘附时间更长。
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液相色谱仪常见故障解决方案
液相色谱仪峰面积重复性不好怎么回事?
主要原因可能有进样阀漏液、加样针不到位或液量不足。针对种情况,处理时应对更换进样阀垫圈;对于第二种情况保证加样针插到底,***样品溶液后须快速、平稳地从LOAD状态转换到INJECT状态,以保证进样量的准确。日常工作中,液相色谱仪的***非常重要,如要注意不要让空气进入输液系统和高压泵中,储液器内的溶液如长时间未用应清洗储液器并更换溶液,每次用完色谱仪后缓冲液要用纯水冲洗干净,防止无机盐析出或沉积;样品的前处理也很重要,任何样品都要尽可能地去除杂质,完全溶解,尽量减少对色谱柱的污染,以延长色谱柱的使用寿命,同时避免***过浓的样品溶液,以免残留液在进样阀内析出固体引起堵塞;色谱柱作好标记,用于不同分析目的的色谱柱不要混用等。
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