离子交换层析中,为什么用氯离子洗脱阴离子

阴离子交换柱的填料是正电填料,在低盐条件下可以通过电荷相互作用吸附样品中的阴离子和负电荷物质（如DNA）.这些带负电的物质由于其带电量不同,分子大小不同,因而与正电填料之间的结合力也就不同.用梯度的氯离子（一般用氯化钠梯度,例如从100mM氯化钠线性梯度升高到1M氯化钠）洗脱挂柱样品时,氯离子会和结合上的物质竞争结合正电填料,伴随着氯离子浓度的不断升高,氯离子的竞争作用越来越强,与填料结合的物质会按照亲和力从弱到强依次洗脱下来,形成***的洗脱峰,从而将这些物质分开.

阳离子交换柱与之正好相反,柱子填料为负电荷,用钠离子洗脱结合的正电物质.

五大类层析技术

-凝胶过滤(GF)

-离子交换(IEX)

-亲和层析(AC)

-疏水层析(HIC)

-反相层析(RPC)

基架–颗粒越细、大小越均匀，分辨率越高，但反压亦较高(SOURCE基架例外)

物理稳定性–新一代介质较坚固，能承受高流速，同时保持柱床体积和结构稳定，省却每次重新装柱,提高重复性化学稳定性-新一代介质能承受pH，高盐度，促溶剂和，利于开发分离条件和在位清洗(CIP)，大大延长介质寿命并提高重复性

如何选择层析填料

按照层析技术原理分类选择填料：凝胶过滤填料选择、离子交换填料选择、亲和填料选择、疏水填料选择、反相填料选择

层析工艺不同阶段选择填料的一般规律根据目的物的性质选择填料

根据目的物的性质选择填料

根据规模选择合适的层析预装柱层析空柱选择

层析空柱选择

特点:结合了Sephadex的高选择性和琼脂糖的高物理稳定性，机械稳定性好,高分辨率高化学稳定性