江西HILIC柱价格承诺守信「慧德易科技」
作者:慧德易科技2022/5/15 7:58:43
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视频作者:北京慧德易科技有限责任公司






液相色谱仪

仪器结构特点:

液相色谱仪是以液体作为流动相的色谱分离方法

流动相具有运载样品分子和选择性分离的双重作用

适用于高沸点、大分子、强极性和热稳定性差的大分子化合物(常温进样不***中的大分子化合物)

色谱柱类型,流动相比例,操作参数(柱温,流动相梯度)可优化分离效果

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液相色谱

HPLC对流动相的一般要求

流动相就比如***的血液,其质量直接影响到整个系统的正常运行与否。

应该使用HPLC级的溶剂,不能互相混溶的溶剂不可以直接切换!一般在水相和与其不混溶的溶剂切换时,使用异作为过渡溶剂。

注意溶剂的截止波长。截止波长是指该溶剂可以在紫外检测器中使用的低波长,低于该波长后,溶剂会有很强的紫外吸收,从而影响极限的稳定性、干扰对所分析物质的检测。

HPLC所使用的水必须是新鲜的和经过0.45μm滤膜过滤过的。建议每天更换新鲜的水。长期不用时,必须把使用水的管路用置换,防止长霉。

仪器使用完后要采用适当的溶剂冲洗等方法维护色谱柱和系统。如果使用了缓冲盐一定先将盐要冲洗干净。

仪器长期不用时,不建议使用纯封存。因为有生成聚合物的趋势。建议使用、/水或/水封存。

当有流路堵塞时,可以尝试将之反接后冲洗。污染的溶剂或溶剂瓶里的藻类生长将会缩短溶剂过滤器的使用寿命,并且影响泵和系统的的性能。这在水溶剂或磷酸盐缓冲液(pH 4 至7) 中尤其如此。






液相色谱常见问题

在日常工作中,遇见液相色谱仪哪些异常情况?又是如何解决的?


峰的问题:峰前沿,峰重叠,峰拖尾,鬼峰,基线漂移。

压力问题:超压,低压,压力波动。

硬件问题:日常损耗,零件损坏。



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液相色谱HPLC是如何工作的?

在柱层析中,溶剂在重力作用下滴入装有吸附剂的色谱柱中。液相色谱是一种改进的柱色谱。在高达400个大气压的高压下,泵输送溶剂通过色谱柱。柱吸附剂或固定相通常是由固体颗粒(如二氧化硅或聚合物)制成的颗粒材料。

与柱色谱相比,利用泵输送,不仅可以快速分析,而且可以使用更小的颗粒作为柱填料。粒子越小,其表面积更大,通过固定相与流动相及样品组分之间的相互作用,可以更好地实现混合物中各组分分离。流动相通常是溶剂(如水、、)的混合物。

混合物的组分由于与吸收剂颗粒的相互作用的程度不同而彼此分离,在此过程中不同组分的洗脱速率不同,从而导致组分流出色谱柱时分离。与柱色谱相比,液相色谱自动化程度高,灵敏度高。







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