连续色谱层析技术

尽管传统色谱分离技术被广为采用，但其仍存在一系列问题亟待解决：

? 溶剂消耗量大，综合生产成本居高不下；

? 填料使用量大，单位填料产出少，工业化生产成本进一步提高；

? 某些低分离度品种分离受限，无法工业化；

? 对于某些特殊样品（如手性药i物），没有太好的解决办法等等。

然而连续色谱分离技术能够实现物料连续使用，应用同等规模的填料和溶剂却可大幅度提高样品处理量，对于某些化学结构相类似的成分，仍然能够获得较理想的分离度和样品回收率。该技术主要能够很好地解决大、小分子原i料药、功能糖等的连续化分离问题，在降低缓冲液用量的同时，提高填料利用率，降低生产成本，目前已经广泛应用于石油化工、食品工程和生***工等领域，如：

ü 糖醇类分离：果葡糖浆、菊粉、低聚果糖、海藻糖、阿拉伯糖、木糖醇、核糖等；

ü 手性药i物和天然产物分离：紫杉醇、鱼i油、芍药苷、大豆卵磷脂、氟i西汀、酮洛i芬等；

ü 精细化工：香精香料、色素、不饱和脂肪酸等；

ü 石化：PX及其类似物、碳五碳六中正异构烷烃等；

ü 生物大分子：蛋白多肽（亲和层析）、核酸等。

层析简介

层析（chromatography）是“色层分析”的简称。利用各组分物理性质的不同，将多组分混合物进行分离及测定的方法。有吸附层析、分配层析两种。一般用于有机化合物、金属离子、氨基酸等的分析。层析利用物质在固定相与流动相之间不同的分配比例，达到分离目的的技术。层析对生物大分子如蛋白质和核酸等复杂的有机物的混合物的分离分析有极高的分辨力。

层析填料交换分离

离子交换层析根据化合物的净电荷进行分离。带负电荷或正电荷的官能团共价结合于固相载体基质，分别成为阳离子交换剂和阴离子交换剂。当一个带电荷的分子加入到带有相反电荷的交换剂时，它就会被吸附，同时，带相同电荷的离子和中性分子则被洗脱到层析柱的外水体积里。带电荷分子的结合是可逆的，通常可用盐或PＨ梯度洗脱吸附的分子。 离子交换层析可以有多种应用，包括分离和纯化生物分子，分离无机离子，***和水的去离子化，盐转换以及去除金属离子、化乙锭和ＳＤＳ。 化合物的分离策略。如果分子在ＰＨ高于其等电点时稳定，可使用阴离子交换树脂。如果分子在ＰＨ低于其等电点时稳定，则使用阳离子交换树脂。

疏水层析

生物分子表面大都有或强或弱的疏水区域，在不同环境下，与各种疏水介质产生不同强弱的结合

高离子强度可加强疏水性

跟离子交换相反，高盐吸附，低盐洗脱;洗脱样品又可直接或稍加稀释后加上其他层析柱，作为连接层析步骤的桥梁，取代盐析沉淀技术

比反相层析的配体密度低很多，无须洗脱，保存生物活性

配体种类繁多，很难预测哪一种、哪一个条件适合，可用疏水层析试盒选择介质