液相色谱仪
仪器结构特点:
液相色谱仪是以液体作为流动相的色谱分离方法
流动相具有运载样品分子和选择性分离的双重作用
适用于高沸点、大分子、强极性和热稳定性差的大分子化合物(常温进样不***中的大分子化合物)
色谱柱类型,流动相比例,操作参数(柱温,流动相梯度)可优化分离效果
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液相色谱法概述
液相色谱根据分离机理的不同可分为:
?液固吸附色谱
?液液分配色谱
?离子交换色谱
?离子对色谱法
?分子排阻色谱(或凝胶渗透色谱)
(一)液-固吸附色谱
流动相为液体,固定相为固体吸附剂,根据物质吸附作用的不同来分离物质。
(二)液-液分配色谱
流动相和固定相都是液体的色谱法即为液-液色谱,是利用样品组分在两种不相溶的液相间的分配来进行分离。一种液相为流动相,另一种是涂于载体上的固定相。
流动相极性小于固定相极性的液-液色谱法称为正相分配色谱法。
流动相极性大于固定相极性的液-液色谱法称为反相分配色谱法。
(三)离子交换色谱
(四)离子对色谱法
(五)分子排阻色谱法
反相液相色谱
柱内填充二氧化硅颗粒,并对其进行改性,通过将长的碳氢链(8~18个C原子)附着在其表面来实现其非极性。使用极性溶剂,例如水和醇的混合物,。由于极性溶剂和混合物中的极性分子之间具有强烈的吸引作用,混合物中的极性化合物将更快地通过色谱柱。非极性分子在通过色谱柱的过程中速度会减慢。它们主要通过范德华分散力和疏水作用与烃基形成不同程度的吸引力。它们在水流动相组分中的可溶性也较低,有助于它们与烃基的相互作用。
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