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液相色谱法概述
液相色谱法自20世纪60年代问世以来,由于使用了高压输液泵、全多孔微粒填充柱和高灵敏度检测器,实现了对样品的高速、和高灵敏度的分离测定。液相色谱由于吸取了经典液相色谱的研制经验,并引入微处理机技术,极大的提高了仪器的自动化水平和分析精度。现在用微处理机控制的液相色谱仪,其自动化程度很高,既能控制仪器的操作参数(如溶剂梯度洗脱、流动相流量、柱温、自动进样、洗脱液收集、检测器功能等),又能对获得的色谱图进行收缩、放大、叠加,以及对保留数据和峰高、峰面积进行处理等,为色谱分析工作者提供了、功能齐全的分析工具。
液相色谱
自动进样器
样品在进样前必须经过适当的预先处理,需要经过亚微米滤膜的过滤或者离心,防止样品中的微小颗粒堵塞管路,好使用流动相作为溶剂配制样品,所用溶剂应该对样品有较好的溶解性。
针座是喇叭口朝上暴露在空气中的,有时空气中的较大灰尘颗粒可能恰好落在针座的流路内而引起针座的堵塞。这时候可以尝试卸下针座,将它接在泵的出口上反冲,一般能解决问题。
如果经常使用缓冲溶液,除了泵头之外,ALS计量泵的柱塞及密封圈,六通阀的转子密封圈和定子密封圈应该定期清洗,防止有盐的颗粒磨损ALS一定要使用Agilent的样品瓶及瓶盖;使用不兼容的或者加工精度差的样品瓶及瓶盖会引起ALS故障率的增加及性能的降低。
液相色谱法可以不做标准曲线吗?
首先要明确做标准曲线的目的,一般是为了含量测定作为标准品来用。液相色谱的浓度和峰面积成正比,样品的含量未知,浓度也就未知,峰面积可读。那么这时需要一个已知含量和已知峰面积的对照品。这个时候做不做标准曲线要看试验方法,有的方法是外标法,也就是和你样品浓度一样的对照品,平行配制两个,进样分析。有的方法是内标法,就需要样品中添加内标物。还有的面积化,那就什么对照都不要进了。方法要看你的质量标准,上面应该有计算方法,上面写的是什么,就按照什么来做。不是非标准曲线不可的。
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