为啥要学习使用液相色谱柱？

色谱柱的使用和***：液相色谱仪由高压液体泵、检测器及液相色谱柱等三部分组成，其中液相色谱柱的正确安装和使用，是液相色谱工作的关键；也是液相色谱工作者获得正确可靠的实验数据的必经之路，建立液相色谱柱日常维护与***规程，保证能正常使用。

液相色谱柱的适用范围：

本规程适用液相色谱柱的维护与***。

责任人：

液相色谱柱使用者。

色谱柱的清洗溶剂

下面列举一些色谱柱的清洗溶剂及顺序，作为参考：硅胶柱以正已烷（或庚烷）、和依次冲洗，然后再以相反顺序依次冲洗，所有溶剂都必须严格脱水。能洗去残留的强极性杂质，已烷使硅胶表面重新活化。反相柱以水、、、（或）依次冲洗，再以相反顺序依次冲洗。如果下一步分析用的流动相不含缓冲液，那么可以省略用水冲洗这一步。能洗去残留的非极性杂质，在（）冲洗时重复***100~200μl四氢数次有助于除去强疏水性杂质。四氢与或的混合溶液能除去类脂。有时也***二甲亚砜数次。此外，用、和三（0.1%）梯度洗脱能除去蛋白质污染。

阳离子交换柱可用稀酸缓冲液冲洗，阴离子交换柱可用稀碱缓冲液冲洗，除去交换性能强的盐，然后用水、、（除去吸附在固定相表面的有机物）、、水依次冲洗。

保存色谱柱时应将柱内充满或，柱接头要拧紧，防止溶剂挥发干燥。禁止将缓冲溶液留在柱内静置过夜或更长时间。

色谱柱使用过程中，如果压力升高，一种可能是烧结滤片被堵塞，这时应更换滤片或将其取出进行清洗；另一种可能是大分子进入柱内，使柱头被污染；如果柱效降低或色谱峰变形，则可能柱头出现塌陷，死体积增大。

在后两种情况发生时，小心拧开柱接头，用洁净小钢将柱头填料取出1~2mm高度（注意把被污染填料取净）再把柱内填料整平。然后用适当溶剂湿润的固定相（与柱内相同）填满色谱柱，压平，再拧紧柱接头。这样处理后柱效能得到改善，但是很难***到新柱的水平。

液相色谱柱的构造 

液相色谱柱由柱管、压帽、卡套式接头（密封圈）、篦板（过滤芯）、连接头、螺钉（筒体）与柱填料等构成。 柱管：常用不锈钢板做成，如果应用时柱压不高过70kg/cm2时，也可选用厚壁管夹层玻璃或石英加热管，管内腔规定有很高的光滑度。用以柱填料的填装。空柱各部件均为金属材质，能承受一般的***。但因为含氟化物的对其有一定的腐蚀，故应用时要留意，柱及联接管中不可以长期留存该类，以防止浸蚀。压帽：即离子交换柱两边套合于柱管端表面的塑性变形圆柱体帽，中间有小圆孔，多见聚四氟乙烯做成，用以固定不动篦板。 密封圈：坐落于连接头螺旋式环内腔的延展性环，多见聚四氟乙烯做成，用以离子交换柱两边压帽与柱表面的密封性。