UniMab的优势
单分散微球基质、高强度和短保留时间下的高动态载量
UniMab亲和层析介质相比市场上同类硬胶或软胶填料有性,“超常规柱高”之所以可惠及实际的抗i体纯化工艺,须满足3个条件:一是微球基质的单分散性,纳微***开发的单分散均一粒径的亲水PMMA微球,粒径50 μm,CV值小于5%,确保批次间重现性和峰形对称性;二是填料机械强度高,能承受更大压力(如:1MPa压力),才可装填至更大柱高;三是在更短驻留时间下具备高动态结合载量(DBC),比如2 ~ 4 min可达到35至45 mg/ml Gel的动态载量。纳微UniMab Protein A介质满足以上三个重要条件,即单分散微球基质、高强度和短保留时间下的高动态载量,因此在超常规柱高下它能发挥传统填料难以具备的优势。
层析填料的类型
在柱层析中,移动相从加入试料的一端展开到达另一端后,继续展开使各成分和移动相一起向柱外分别溶出,这就是广泛使用的所谓洗提层析(elution chromatography)。层析根据固定相与溶质(试料)间亲和力的差异分为吸附型、分配型、离子交换型(离子交换层析)等三种类型。但这并不是很严格的,有时常见到其中间类型。此外,近来也应用亲和层析,即将与基质类似的化合物(通常为共价键)结合到固定相上,再利用其特异的亲和性沉淀与其对应的特定的酶或蛋白质。
层析填料寿命衰减的影响因素
样品状态
a.样品澄清度:样品越澄清对填料的寿命衰减影响越小。
b.样品粘度:样品的粘度越小,对填料寿命的影响越小。
c.样品酸碱度:过酸过碱都会加速填料寿命的衰减。
d.样品离子强度:离子强度越高填料寿命衰减的越快。
e.样品成分组成:样品成分越复杂,层析过程越复杂,填料的寿命衰减越快(这也与填料所处的工艺阶段吻合,捕获粗纯阶段填料寿命衰减的更快,精纯阶段填料寿命衰减的慢。)
层析工艺
a.柱床高度,流速及反压越大,工艺过程填料受到的外力就会增大,填料的寿命衰减就会增大。
b.层析工艺过程的缓冲液的种类及洗脱的CV数也会影响填料的寿命,缓冲液越温和对填料寿命衰减影响越小,洗脱CV数越小对填料寿命衰减影响越小。
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