昭和GPC柱常用指南「慧德易科技」
作者:慧德易科技2022/3/8 4:15:42
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视频作者:北京慧德易科技有限责任公司






液相色谱仪

仪器结构特点:

液相色谱仪是以液体作为流动相的色谱分离方法

流动相具有运载样品分子和选择性分离的双重作用

适用于高沸点、大分子、强极性和热稳定性差的大分子化合物(常温进样不***中的大分子化合物)

色谱柱类型,流动相比例,操作参数(柱温,流动相梯度)可优化分离效果

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液相色谱法概述

HPLC是在经典的液相色谱法基础上发展起来的,其以液体作为流动相,并采用颗粒极细的固定相的柱色谱分离技术。其分离机制与常规柱色谱相同,但填料更加精细,需高压泵推动,柱效高,分析速度快。与气相色谱不同的是液相色谱中流动相亦参与组分的分离过程,其组成、比例和pH值可灵活调节,分离模式多样。在实际操作中主要通过改变流动相的组成来调节样品在色谱柱的保留值和选择性,从而使不同样品得到分离。







反相液相色谱

柱内填充二氧化硅颗粒,并对其进行改性,通过将长的碳氢链(8~18个C原子)附着在其表面来实现其非极性。使用极性溶剂,例如水和醇的混合物,。由于极性溶剂和混合物中的极性分子之间具有强烈的吸引作用,混合物中的极性化合物将更快地通过色谱柱。非极性分子在通过色谱柱的过程中速度会减慢。它们主要通过范德华分散力和疏水作用与烃基形成不同程度的吸引力。它们在水流动相组分中的可溶性也较低,有助于它们与烃基的相互作用。






液相色谱仪常见故障解决方案

出现压力波动大,流量不稳定该怎么办?

造成这种情况的原因是系统中有空气或者单向阀的宝石球和阀座之间夹有***,使得两者不能密封。处理工作中注意观察流动相的量,保证不锈钢滤器沉入储液器瓶底,避免吸入空气,流动相要充分脱气。如为单向阀和阀座之间夹有***,拆下单向阀,放入盛有的烧杯用超声波清洗。







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