连续色谱层析简介

众所周知，传统色谱分离技术是采用固定的色谱塔进行，***入一定量物料，然后采用洗脱剂不断洗脱，在同一出口在不同时间段就可接到不同的产品组分，此过程明显费时费力；而连续色谱分离技术则是利用不同物质在由固定相和流动相构成的体系中具有不同的分配系数，当两相作相对运动时，这些物质随流动相一起运动，并在两相间进行反复多次的分配，

层析填料的用途

用作固定相的有硅胶、活性炭、氧化铝、离子交换树脂、离子交换纤维等，或是在硅藻土和纤维素那样的无活性的载体上附着适当的液体，也可使用其他物质。将作为固定相的微细粉末状物质装入细长形圆筒中进行的层析称为柱层析（column chromatogra-phy），在玻璃板上涂上一层薄而均的物质作为固定相的称为薄层层析（thin-layer chromatography），后者可与用滤纸作为固定相的纸上层析进行同样的分析，即在固定相的一端，点上微量试料，在密闭容器中，使移动相（液体）从此端渗入，移动接近另一端。通过这种展开操作，各成分呈斑点状移动到各自的位置上，再根据Rf值的测定进行鉴定。当斑点不易为肉眼观察时，可利用适当的显色剂，或通过紫外灯下产生荧光的方法进行观察。也可采用在种移动相展开后再用另一移动相进行展开（这时的展开方向应与原方向垂直），使各成分分离完全的双向层析（two-dimensional chromatography）。

层析填料寿命衰减的影响因素

样品状态

a.样品澄清度：样品越澄清对填料的寿命衰减影响越小。

b.样品粘度：样品的粘度越小，对填料寿命的影响越小。

c.样品酸碱度：过酸过碱都会加速填料寿命的衰减。

d.样品离子强度：离子强度越高填料寿命衰减的越快。

e.样品成分组成：样品成分越复杂，层析过程越复杂，填料的寿命衰减越快（这也与填料所处的工艺阶段吻合，捕获粗纯阶段填料寿命衰减的更快，精纯阶段填料寿命衰减的慢。）

层析工艺

a.柱床高度，流速及反压越大，工艺过程填料受到的外力就会增大，填料的寿命衰减就会增大。

b.层析工艺过程的缓冲液的种类及洗脱的CV数也会影响填料的寿命，缓冲液越温和对填料寿命衰减影响越小，洗脱CV数越小对填料寿命衰减影响越小。