液相色谱仪与气相色谱区别
液相色谱仪在基本原理上和气相色谱仪是一致的,所以设备的基础原理差不多,但是他们在检测方面是有不相同的地方的,有不相同的,但又有不同之处:液相色谱 与气相色谱的主要区别可归结于以下几点:
1、进样方式的不同:液相色谱仪只要将样品制成溶液,而气相色谱需加热气化或裂解;2、流动相的不同,在被测组分与流动相之间、流动相与固定相之间都存在着一定的相互作用力;
3、由于液体的粘度较气体大两个数量级,使被测组分在液体流动相中的扩散系数比在气体流动相中约小4~5个数量级;
4、由于流动相的化学成分可进行广泛选择,并可配置成二元或多元体系,满足梯度洗脱的需要,因而提高了液相色谱的分辨率(柱效能);
5、液相色谱采用5~10Lm细颗粒固定相,使流体相在色谱柱上渗透性大大缩小,流动阻力增大,必须借助高压泵输送流动相;
6、液相色谱仪是在液相中进行,对被测组分的检测,通常采用灵敏的湿法光度检测器,例如,紫外光度检测器、示差折光检测器 、荧光光度检测器等;
7、液相色谱与气相色谱相比较,液相色谱同样具有高灵敏度、能和高速度的特点。
8、液相色谱的定性和定量分析,与气相色谱分析相似,在定性分析中,采用保留值定性,或与其他定强的仪器分析 法连用;在定量分析中,采用测量峰面积的化法、内标法或外标法等,但液相色谱在分离复杂组分式样时,有些组分常不能出峰,因此化法定量受到限制,而内标法定量则被广泛使用。
液相色谱柱流动性
1、在进行样品检测前,至少使用20倍柱体积流动相使色谱柱充分平衡。流动相一定要使用色谱级别的溶剂。如使用水相的缓冲液应当天配制以保持新鲜避免***产生。
2、流动相使用前需用微孔滤膜过滤,消除流动相中颗粒对色谱系统和色谱柱的损坏。缓冲液与其他流动相混合后应重新过滤避免溶解度变化造成产生新的沉淀。不应使用纯水作为流动相冲洗C18色谱柱,以免柱性能损坏(添加5%的冲洗色谱柱,同时可以达到对缓冲盐清洗的作用。还可以使色谱柱更容易平衡)。
3、流动相需脱气后使用,可避免因气泡导致的泵和检测器的工作不正常。如果测试时使用的流动相与色谱柱保存使用的流动相有较大区别,应该使用过度分布的形式进行平衡。避免由于流动相的突然变化造成柱压增加过大或流动相缓冲盐结晶造成对色谱柱和仪器系统的损坏。正相色谱柱比反相色谱柱需要更长的平衡时间。
液相色谱柱注意事项
色谱柱的正确使用和维护十分重要,稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。在色谱操作过程中,需要注意下列问题,以维护色谱柱。
① 避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。温度的突然变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况;柱压的突然升高或降低也会冲动柱内填料,因此在调节流速时应该缓慢进行,在阀进样时阀的转动不能过缓。
② 应逐渐改变溶剂的组成,特别是反相色谱中,不应直接从改变为全部是水,反之亦然。
③ 一般说来色谱柱不能反冲,只有生产者指明该柱可以反冲时,才可以反冲除去留在柱头的杂质。否则反冲会迅速降低柱效。
④ 选择使用适宜的流动相(尤其是pH),以避免固定相被***。有时可以在进样器前面连接一预柱,分析柱是键合硅胶时,预柱为硅胶,可使流动相在进入分析柱之前预先被硅胶“饱和”,避免分析柱中的硅胶基质被溶解。
⑤ 避免将基质复杂的样品尤其是生物样品直接注入柱内,需要对样品进行预处理或者在进样器和色谱柱之间连接一保护柱。保护柱一般是填有相似固定相的短柱。保护柱可以而且应该经常更换。
⑥ 经常用强溶剂冲洗色谱柱,清除保留在柱内的杂质。在进行清洗时,对流路系统中流动相的置换应以相混溶的溶剂逐渐过渡,每种流动相的体积应是柱体积的20倍左右,即常规分析需要50~75ml。
固相萃取柱和液相色谱柱的较为
二者实质上是不一样的东西,固相萃取柱是拿来做固相萃取用的,关键功能是过滤系统和聚集样品,而液相色谱柱是液相色谱上采用的,用于剖析样品的。 固相萃取柱是样品解决的过程中用的,液相色谱柱是仪器设备上的一个零配件等同于,机器不可或缺的一部分,使成分分离才进探测器检验的。 之上便是有关固相萃取柱的相关内容详细介绍,若有要求,热烈欢迎拨通站点上的服务***!
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