液相色谱仪

仪器结构特点：

液相色谱仪是以液体作为流动相的色谱分离方法

流动相具有运载样品分子和选择性分离的双重作用

适用于高沸点、大分子、强极性和热稳定性差的大分子化合物（常温进样不***中的大分子化合物）

色谱柱类型，流动相比例，操作参数（柱温，流动相梯度）可优化分离效果

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洗脱系统：

分等度洗脱和梯度洗脱

等度洗脱：流动相比例保持不变

梯度洗脱系统：流动相比例随时间变化高压梯度洗脱系统低压梯度洗脱系统梯度洗脱主要是优化色谱条件，达到好的分离。

液相色谱HPLC是如何工作的？

在柱层析中，溶剂在重力作用下滴入装有吸附剂的色谱柱中。液相色谱是一种改进的柱色谱。在高达400个大气压的高压下，泵输送溶剂通过色谱柱。柱吸附剂或固定相通常是由固体颗粒（如二氧化硅或聚合物）制成的颗粒材料。

与柱色谱相比，利用泵输送，不仅可以快速分析，而且可以使用更小的颗粒作为柱填料。粒子越小，其表面积更大，通过固定相与流动相及样品组分之间的相互作用，可以更好地实现混合物中各组分分离。流动相通常是溶剂（如水、、）的混合物。

混合物的组分由于与吸收剂颗粒的相互作用的程度不同而彼此分离，在此过程中不同组分的洗脱速率不同，从而导致组分流出色谱柱时分离。与柱色谱相比，液相色谱自动化程度高，灵敏度高。

液相色谱仪常见故障解决方案

液相色谱仪峰面积重复性不好怎么回事？

主要原因可能有进样阀漏液、加样针不到位或液量不足。针对种情况，处理时应对更换进样阀垫圈；对于第二种情况保证加样针插到底，***样品溶液后须快速、平稳地从LOAD状态转换到INJECT状态，以保证进样量的准确。日常工作中，液相色谱仪的***非常重要，如要注意不要让空气进入输液系统和高压泵中，储液器内的溶液如长时间未用应清洗储液器并更换溶液，每次用完色谱仪后缓冲液要用纯水冲洗干净，防止无机盐析出或沉积；样品的前处理也很重要，任何样品都要尽可能地去除杂质，完全溶解，尽量减少对色谱柱的污染，以延长色谱柱的使用寿命，同时避免***过浓的样品溶液，以免残留液在进样阀内析出固体引起堵塞；色谱柱作好标记，用于不同分析目的的色谱柱不要混用等。