液相色谱仪

洗脱系统：

分等度洗脱和梯度洗脱

等度洗脱：流动相比例保持不变

梯度洗脱系统：流动相比例随时间变化高压梯度洗脱系统低压梯度洗脱系统梯度洗脱主要是优化色谱条件，达到好的分离。

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液相色谱法

液相色谱法的应用范围十分广泛，对样品的适用性广，不受分析对象挥发性和热稳定性的限制，几乎所有的化合物包括高沸点、极性、离子型化合物和大分子物质均可用液相色谱法分析测定，因而弥补了气相色谱法的不足。在目前已知的有机化合物中，可用气相色谱分析的约占20% ，而80% 则需用液相色谱来分析。HPLC因其具有分离效能高、分析速度快、检测灵敏度好、能分析和分离高沸点且不能气化的热不稳定生理活性物质的特点而被广泛应用于生***学、及临床分析，己将该法收载于药典。

液相色谱

自动进样器

样品在进样前必须经过适当的预先处理，需要经过亚微米滤膜的过滤或者离心，防止样品中的微小颗粒堵塞管路，好使用流动相作为溶剂配制样品，所用溶剂应该对样品有较好的溶解性。

针座是喇叭口朝上暴露在空气中的，有时空气中的较大灰尘颗粒可能恰好落在针座的流路内而引起针座的堵塞。这时候可以尝试卸下针座，将它接在泵的出口上反冲，一般能解决问题。

如果经常使用缓冲溶液，除了泵头之外，ALS计量泵的柱塞及密封圈，六通阀的转子密封圈和定子密封圈应该定期清洗，防止有盐的颗粒磨损ALS一定要使用Agilent的样品瓶及瓶盖;使用不兼容的或者加工精度差的样品瓶及瓶盖会引起ALS故障率的增加及性能的降低。

液相色谱仪常见故障解决方案

如何排除液相色谱仪气泡溢出的故障？

流动相内产生都无法清除不断产生的气泡，主要是因为过滤器长期沉浸于铵等缓冲液内，过滤器内部由于霉菌的生长繁殖，形成菌团，阻塞了过滤器，缓冲液难以流畅地通过过滤器，空气在泵的压力作用下经过滤器进入流动相。处理过滤器浸泡于5%溶液中，超声清洗几分钟即可；亦可将过滤器浸泡于5%溶液中12～36小时，轻轻震荡几次，再将过滤器用纯水清洗几次，打开泄压阀，打开purge键清洗脱气，如仍有气泡不断从过滤器冒出，继续将过滤器浸泡于5%溶液中，如没有气泡不断从过滤器中冒出，说明过滤器内部的霉菌菌团已被***，流动相可以流畅地通过过滤器。打开泄压阀，打开泵，流速调至1.0～3.0ml/min，纯水冲洗过滤器1小时左右。即可将过滤器清洗干净。关闭泄压阀，纯冲洗半小时即可。