连续色谱层析技术
尽管传统色谱分离技术被广为采用,但其仍存在一系列问题亟待解决:
? 溶剂消耗量大,综合生产成本居高不下;
? 填料使用量大,单位填料产出少,工业化生产成本进一步提高;
? 某些低分离度品种分离受限,无法工业化;
? 对于某些特殊样品(如手性药i物),没有太好的解决办法等等。
然而连续色谱分离技术能够实现物料连续使用,应用同等规模的填料和溶剂却可大幅度提高样品处理量,对于某些化学结构相类似的成分,仍然能够获得较理想的分离度和样品回收率。该技术主要能够很好地解决大、小分子原i料药、功能糖等的连续化分离问题,在降低缓冲液用量的同时,提高填料利用率,降低生产成本,目前已经广泛应用于石油化工、食品工程和生***工等领域,如:
ü 糖醇类分离:果葡糖浆、菊粉、低聚果糖、海藻糖、阿拉伯糖、木糖醇、核糖等;
ü 手性药i物和天然产物分离:紫杉醇、鱼i油、芍药苷、大豆卵磷脂、氟i西汀、酮洛i芬等;
ü 精细化工:香精香料、色素、不饱和脂肪酸等;
ü 石化:PX及其类似物、碳五碳六中正异构烷烃等;
ü 生物大分子:蛋白多肽(亲和层析)、核酸等。
亲和层析
配体偶联在介质上,纯化能与配体结合的生物分子;通常一步便能得到高纯的样品;配体的特异性越强,所获产品纯度越高用亲和介质提纯单抗非常方便,以重组蛋白A的载量高;蛋白G则能结合更多不同源的IgG
金属鳌合介质(Chelating Sepharose Fast Flow)可反复鳌合不同金属,再用已结合依赖不同金属的蛋白,一种介质可做多种纯化工作
其他常用配体包括:肝素-纯化.酶III,凝血因子脂酶等Cibacron Blue(颜料)-纯化白蛋白,干扰素等外源凝集素如球蛋白A-多糖,糖蛋白等Glutathione谷胱甘三肽-重组融合蛋白等等.
可自行把所需配体偶联到活化偶联介质,的是NHS activated 4 Fast Flow和CNBr activated 4 FF;要注意化学基好不会参与配体和被纯化生物分子的结合作用中
气相色谱法(GC)是在柱层析基本上发展
壮大下去的一种新式仪器设备方式 ,是色谱发展趋势中为完善的技术性。它以稀有气体为流动性相,利用经获取、提纯、浓缩后的农yao药(Ops)引入气相色谱柱,提温汽化后,不一样的Ops在稳固看中分离出来,经不一样的探测器检验扫勾画出气相色谱图,根据保存期来定性,根据峰或峰总面积与标曲对比来定量,具备即定性又定量。
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