液相色谱仪
从价格上比较:一般情况下,二元高压梯度的价格会比四元低压梯度高很多的(如果其他配置都相同的话)。 二元泵通常是指高压梯度,四元泵指低压梯度.高压是指两个泵分别送液在泵后的混合室内混合.而低压是依靠电磁阀的切换使泵分段输送不同流动相,同样在泵后的混合室内混合.主要区别在于低压混合是容易产生气泡.高压则不容易产生气泡.低压应注意清洗,尤其使用缓冲盐时,避免将电磁阀送液管路堵住(低压系统需要配备在线脱气机 )
液相色谱的基本原理
液相色谱基本原理是分离度(也叫分辨率)正比于
四分之理论塔板数n的平方根乘以
选择因子a比上a-1再乘以
分离因子k+1比上k
我认为分离度和这些变量是正比关系而不是准确的等于,如果非要说是等于的关系,再加上一个常数可能会更合理。
n和柱长(正比)、粒径(反比)、固定项填料(全多孔硅胶型,表面多孔/核壳型)有关
a和流动相种类(反向色谱:和)、pH(2到9)、柱温有关
分离因子/保留因子(平衡状态下,固定相中含量与流动相中的比值)和流动相种类、流动相比例、柱温、固定相填料有关
液相色谱仪常见故障解决方案
液相色谱柱压升高的原因是什么?
造成柱压升高的原因很多。一般是由于柱床内产生了异常的占位性物体,造成流体阻力加大所引起的。例如,缓冲液盐分如(铵等)沉积于柱内,或样品污染沉积。针对种情况,处理时应先用40~50℃的纯水,低速正向冲洗柱子,待柱压逐渐下降后,相应提高流速冲洗,柱压大幅度下降后,用常温纯水冲洗,之后用纯冲洗柱子30分钟;对于第二种情况,由样品的沉积引起污染的C18柱,和纯水反向冲洗柱子,然后换成冲洗,接着用+异(4+6)冲洗柱子(冲洗时间的长短由样品污染的情况而定),再用换成冲洗,然后用纯水冲洗,冲洗正向冲洗柱子30分钟以上。
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