液相色谱
GC与LC的比较
由于HPLC分析不受温度和样品沸点限制,因此具有更广阔的应用潜力。经过30多年的迅速发展,液相色谱法在基础理论、仪器装置和色谱柱等方面的研究已趋于成熟,现已成为化学化工、环境、药学、食品等多个领域中具优势的分离分析方法之一。
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液相色谱法概述
液相色谱根据分离机理的不同可分为:
?液固吸附色谱
?液液分配色谱
?离子交换色谱
?离子对色谱法
?分子排阻色谱(或凝胶渗透色谱)
(一)液-固吸附色谱
流动相为液体,固定相为固体吸附剂,根据物质吸附作用的不同来分离物质。
(二)液-液分配色谱
流动相和固定相都是液体的色谱法即为液-液色谱,是利用样品组分在两种不相溶的液相间的分配来进行分离。一种液相为流动相,另一种是涂于载体上的固定相。
流动相极性小于固定相极性的液-液色谱法称为正相分配色谱法。
流动相极性大于固定相极性的液-液色谱法称为反相分配色谱法。
(三)离子交换色谱
(四)离子对色谱法
(五)分子排阻色谱法
液相色谱常见问题
在日常工作中,遇见液相色谱仪哪些异常情况?又是如何解决的?
峰的问题:峰前沿,峰重叠,峰拖尾,鬼峰,基线漂移。
压力问题:超压,低压,压力波动。
硬件问题:日常损耗,零件损坏。
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反相液相色谱
柱内填充二氧化硅颗粒,并对其进行改性,通过将长的碳氢链(8~18个C原子)附着在其表面来实现其非极性。使用极性溶剂,例如水和醇的混合物,。由于极性溶剂和混合物中的极性分子之间具有强烈的吸引作用,混合物中的极性化合物将更快地通过色谱柱。非极性分子在通过色谱柱的过程中速度会减慢。它们主要通过范德华分散力和疏水作用与烃基形成不同程度的吸引力。它们在水流动相组分中的可溶性也较低,有助于它们与烃基的相互作用。
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