拉曼光谱在***研究中的应用
各种***因所含化学成分的不同而反映出拉曼光谱的差异,拉曼光谱在***研究中的应用包括:
(1)***化学成分分析
薄层色谱(TLC)能对***进行有效分离但无法获得各组份化合物的结构信息,而表面增强拉曼光谱(SERS)具有峰形窄、灵敏度高、选择性好的优点,可对***化学成分进行高灵敏度的检测。利用TLC的分离技术和SERS的***性鉴定结合,是一种在TLC原位分析***成分的新方法。
(2)***的无损鉴别
由于拉曼光谱分析,无需***样品,因此能对***样品进行无损鉴别,这对名贵中***的研究特别重要。
(3)***的稳定性研究
利用拉曼光谱动态跟踪***的变质过程,这对***的稳定性预测、监控***的质量具有直接的指导作用。
(4)中药的优化
对于***和复方这一复杂的混合物体系,不需任何成分分离提取直接与***和细胞作用,利用拉曼光谱无损采集***和细胞的光谱图,观察***和细胞的损伤程度,研究其药理作用,并进行中***和方剂的优化研究。
先了解一下激光拉曼光谱
拉曼光谱法是研究化合物分子受光照射后所产生的散射,散射光与入射光能级差和化合物振动频率、转动频率的关系的分析方法。
与红外光谱类似,拉曼光谱是一种振动光谱技术。所不同的是,前者与分子振动时偶极矩变化相关,而拉曼效应则是分子极化率改变的结果,被测量的是非弹性的散射辐。
一定波长的电磁波作用于被研究物质的分子,引起分子相应能级的跃迁,产生分子吸收光谱。引起分子电子能级跃迁的光谱称电子吸收光谱,其波长位于紫外~可见光区,故称紫外-可见光谱。
电子能级跃迁的同时伴有振动能级和转动能级的跃迁。引起分子振动能级跃迁的光谱称振动光谱,振动能级跃迁的同时伴有转动能级的跃迁。拉曼散射光谱是分子的振动-转动光谱。用远红外光波照射分子时,只会引起分子中转动能级的跃迁,得到纯转动光谱。
拉曼光谱的优点在于它的快速,准确,测量时通常不***样品(固体,半固体,液体或气体),样品制备简单甚至不需样品制备。谱带信号通常处在可见或近红外光范围,可以有效地和光纤联用。
这也意味着谱带信号可以从包封在任何对激光透明的介质,如玻璃,塑料内,或将样品溶于水中获得。现代拉曼光谱仪使用简单,分析速度快(几秒到几分钟),性能很可靠。因此,拉曼光谱与其他分析技术联用比其他光谱联用技术从某种意义上说更加简便(可以使用单变量和多变量方法以及校准。
为什么测试时一些光谱给出十分强的背景信号,而这些信号湮盖了拉曼信号?
一些发荧光或磷光的样品在测量时会给出非常高的背景光谱。令人遗憾的是这些是样品材料的本征性质,是激光辐照下无法避免的结果,而且通常情况下荧光比拉曼信号更强。尽管这样,我们仍可采取一些措施减少或减轻荧光***。
猝灭:一些样品可采用测试前将激光辐照在表面一段时间对荧光进行猝灭以减小荧光光谱的背景增强拉曼信号。猝灭的时间根据样品不同可从几分钟到几小时。值得注意的是:猝灭效应是呈指数衰减的,一开始就可观察到。
共焦模式:采用共焦模式测量强光下辐照的小体积样品时荧光将会大大降低。该法也同样适合有荧光衬底的样品,例如被荧光物质基体包裹的样品。
改变激发激光的波长:有时改变波长是仅有可行的避免荧光干扰的方法。
如果拉曼实验室里有太多的室内光源比如荧光、白炽灯或日光灯等,这会在测试光谱上出现不必要的背景信号。因此在测试的时候应将室内光关闭或降到很小或用遮光罩将样品台罩住以避免外界的杂散光进入光谱仪。
拉曼光谱仪
开箱观察:
1. 肯定不是量产的产品,似乎是纯手工打造。光学量产产品质量与精密加工工艺的高低密不可分。
2. 光栅似乎是从Edmund 买的,1800/HVIS。
3. 有两个785 nm long pass filter。
4. 10到100微米直径的Pinhole 嵌在光筒里面,很难调整位置。
5. 大部分零件可拆卸,但不可调。
6. 激光器(IPS 100mW 785 nm TO-56 laser)有一段时间经常用拉曼的激光做实验,估计使用过于频繁而烧掉,后方有三个螺丝可以微调倾角。
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