荧光定量PCR仪的技术原理

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所谓real-time Q-PCR技术，是指在PCR反应体系中加入荧光***，利用荧光信号累积实时监测整个PCR进程，后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。在 real-time 技术的发展过程中，两个重要的发现起着关键的作用：（1）在90年代早期，TaqDNA多聚酶的5′核酸外切酶活性的发现，它能降解特异性荧光记探针，因此使得间接的检测PCR产物成为可能。（2）此后荧光双标记探针的运用使在一密闭的反应管中能实时地监测反应全过程。这两个发现的结合以及相应的仪器和***的商品化发展导致real-time Q-PCR方法在研究工作中的运用。

荧光定量PCR的病原体检测

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目前，采用荧光定量PCR检测技术可以对解脲支原体、人类瘤病毒、单纯病毒、肝的病毒、病毒、EB病毒和巨细胞病毒等病原体进行定量测定。与传统的检测方法相比具有灵敏度高、取样少、快速简便等优点。如：菌***诊断的意义主要表现在：a.区分TB；b.检测TB耐药***；c.提高TB的阳性检出率。

荧光定量PCR

荧光定量PCR( realtime fluorescence quantitative PCR，RTFQ PCR) 是1996 年由美国Applied Biosystems 公司推出的一种新定量试验技术，它是通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针，对PCR产物进行标记跟踪，实时在线监控反应过程，结合相应的软件可以对产物进行分析，计算待测样品模板的初始浓度。